[发明专利]乌骨藤皂苷H及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种具有抗肿瘤活性的乌骨藤皂苷H，其特征在于采用高效液相色谱法测定，含量范围为60％～99.8％。

2.一种具有抗肿瘤活性的乌骨藤皂苷H，其制备方法由以下几步组成：

(1)取乌骨藤药材，加适量溶剂提取，合并提取液；

(2)提取液浓缩后，过滤，滤液上大孔树脂柱，上柱完成后，加水洗脱去除大极性杂质，改用乙醇洗脱，至洗脱液中无乌骨藤皂苷H，收集洗脱液；

(3)洗脱液减压浓缩成稠膏，减压干燥，粉碎，得乌骨藤总皂苷粗品；

(4)取乌骨藤总皂苷粗品，加入适量有机溶剂加热回流提取，过滤，残渣弃去，提取液合并浓缩至一定体积，冷却，加入微量纯度大于98％的乌骨藤皂苷H结晶作为晶种，静置结晶，过滤，干燥，得类白色乌骨藤皂苷H粗品。

(5)取上述乌骨藤皂苷H粗品，加适量溶剂加热回流溶解后，过滤，滤液冷却，加入微量纯度大于99％的乌骨藤皂苷H结晶作为晶种，静置，重结晶，重复上述重结晶步骤2～4次，得高含量的乌骨藤皂苷H。

3.根据权利要求1所述的乌骨藤皂苷H，其特征在于可以加入适量药学上可接受的载体进一步制成各种适合于临床应用的制剂，包括片剂、胶囊、滴丸、软胶囊、粉针或注射液。

4.根据权利要求2所述的乌骨藤皂苷H的制备方法，其特征在于步骤(1)中的提取方式为加热提取；提取溶剂可以是水、甲醇或乙醇，优选使用乙醇作为提取溶剂；其浓度为50％～95％，优选浓度为80％；提取溶剂的用量为药材量的5～12倍(M/V)，优选为7倍量；提取次数为2～4次，优选3次。

5.根据权利要求2所述的乌骨藤皂苷H的制备方法，其特征在于步骤(2)中，将提取液浓缩至药材量的5～10倍(M/V)后再上柱，优选为7～8倍量；所用的大孔吸附树脂型号可为HPD-100、HPD-400、HPD-500、HPD-600、D101、D1300，优选大孔吸附树脂型号为D101；洗脱用乙醇的浓度为50～95％，优选浓度为65％；洗脱溶剂用量为药材量的2～6倍(M/V)，优选为3～4倍量。

6.根据权利要求2所述的乌骨藤皂苷H的制备方法，其特征在于步骤(3)中，乙醇洗脱液在55～75℃下减压回收，优选60℃；减压干燥温度为65～75℃，优选为70℃；粉碎后颗粒粒度为40～100目，优选为80目。

7.根据权利要求2所述的乌骨藤皂苷H的制备方法，其特征在于步骤(4)中，结晶所用的有机溶剂为丙酮、乙酸乙酯、异丙醇、正丁醇或异丙醚，或是以上溶剂中两种或几种的组合，优选为乙酸乙酯；提取次数为2～4次，优选为3次；结晶时间为6～24小时，优选为12小时。

8.根据权利要求2所述的乌骨藤皂苷H的制备方法，其特征在于步骤(5)中，所用的结晶溶剂可以为水、甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、乙酸乙酯、异丙醚或冰醋酸，或是以上溶剂中两种或几种溶剂的组合，优选为甲醇一水组合，更优选的比例为甲醇∶水(75∶25)。

9.根据权利要求3所述适合于临床应用的乌骨藤皂苷H制剂，其特征在于每个制剂单位含乌骨藤皂苷H的量为2mg～100mg。