[发明专利]一种提高聚乳酸类微球对水溶性蛋白包封率的方法

说明书

技术领域

一种提高聚乳酸类微球对水溶性蛋白包封率的方法，确切的说是一种通过改进复乳法(W/O/W)制备聚乳酸类微粒，提高对水溶性蛋白包封率的方法，属于药物制剂领域。

背景技术

可生物降解材料的载药微球，可通过对释药速率的控制或靶向作用来显著提高临床用药的安全性和有效性，适用于多种给药方式和给药途径。聚乳酸类成球材料，包括聚乳酸PLA、乳酸/羟基乙酸共聚物PLGA及两者的衍生物等，是迄今为止国内外研究最多、应用最广的可生物降解的合成高分子材料。PLA、PLGA等聚乳酸类材料目前被公认为良好的可生物降解的控释骨架具有良好的生物相容性，不会引起明显炎症反应、免疫反应和细胞毒性反应，已获美国FDA批准。采用聚乳酸类材料如PLA、PLGA作为载药微球、纳米粒的载体，可以起到保护药物、增溶、提高生物利用度的作用，尤其适用于目前研究开发较多的多肽、疫苗、激素等生物大分子药物。此类药物经PLA或PLGA包埋制备成缓释微球注射剂，可有效拓宽给药途径，提高药物的生物利用率。在药物释放方面，可以根据药物的性质、给药途径和释药时间，选用不同聚合程度和不同亲疏水性的聚乳酸类材料，采用相应的制备工艺，通过调整聚合物的组成、分子量、载药量及粒径的大小等因素，来控制药物达到不同的释放特征。

但是由于PLA、PLGA为疏水性材料，因此其对水溶性药物的包封率较低；同时疏水作用还容易造成对蛋白质结构的破坏，从而使蛋白质失活或者活性降低。因此如何提高亲水性蛋白的包封率，保持蛋白质在微球中的活性，提高蛋白的稳定性，成为聚乳酸类微球对亲水性蛋白载药方面成功应用的关键问题。

乳化-溶剂挥发法中的复乳法(W/O/W)是应用最广泛的用于包封水溶性药物的方法，水溶性蛋白分子的聚乳酸类微粒，通常采用复乳法(W/O/W)进行制备。该方法避免了O/O法中内油相对活性药物(如基因、蛋白质类药物)的破坏。但是该法对水溶性蛋白的包封率一般较低，不能达到临床应用的要求，同时蛋白在制备过程中变性，造成包封药物活性的下降。大部分研究者通过合成新的材料来提高水溶性蛋白的包封率和活性，但这些新合成的材料应用到临床还需要很长的周期。部分研究者试图通过对复乳法(W/O/W)的改进，以提高药物的包封率。例如期刊J Micoencapsulation的第21卷第7期(p775-785)以及中国发明专利CN1460468报道的等报道了一种改进的复乳法，该法采用Tween替代PVA作为乳化剂，以含有或不含水溶性盐或多元醇(或糖、多糖)水溶液为外水相，可提高PLGA微球对牛血清白蛋白的包封率，但该法不能提高蛋白的稳定性；又如中国发明专利CN1575792公开了一种提高蛋白在包封过程中稳定性的方法，其特征为在内水相中添加非离子型表面活性剂聚氧乙烯与聚氧丙稀共聚物，但该法没有提出提高包封率的途径。

从复乳法制备的工艺和原理来看，造成蛋白质失活和流失的原因主要包括：1)材料与药物相容性较差，内水相的蛋白质药物在形成微球的过程中，向外水相扩散，造成药物的流失和失活；如果溶剂挥发速度较慢，在微球固化时间延长，将导致药物向外水相的扩散量的进一步增加，而包封率降低；2)蛋白质药物在乳化过程中和油相接触，以及在乳滴的油水界面聚集而发生变性，造成蛋白质的失活。针对上述问题，提高复乳法对水溶性蛋白质包封率的关键途径在于：减小内水相药物向外水相扩散，抑制蛋白质分子和乳化系统的油水界面发生亲疏水相互作用，适当加快溶剂挥发速度。

发明内容

本发明的目的是通过对现有复乳法(W/O/W)制备聚乳酸类微球技术的改进，提高聚乳酸类微球对水溶性蛋白的包封率和蛋白质的稳定性。

本发明以本领域内广为使用的复乳法(W/O/W)为基础，通过如下技术方案实现：一种提高聚乳酸类微球对水溶性蛋白包封率的方法，包括以下步骤：