[发明专利]测定血清、血浆中钾离子含量的液体双试剂诊断试剂盒

权利要求书

1.一种测定钾离子浓度的稳定的液体双试剂试剂盒，其由试剂1 和试剂2组成，其中试剂1由50-250mM，pH6.0-10的缓冲液、5-30mM 的烯醇式丙酮酸、5-20mM的腺苷二磷酸、0.1-1mM的还原型辅酶、 0.2-5KU的丙酮酸激酶、0.1-5g/L的螯合剂、0.1-3g/L的防腐剂、1-30％ 的稳定剂、0.1-5g/L的表面活性剂、0.1-5mM的反应加速剂组成，其还 包括由10-1000U再生系统酶、5-100mM底物组成的再生酶循环系统； 试剂2由50-250mM，pH6.0-10的缓冲液、0.2-5KU的丙酮酸激酶、 1.0-100KU/L的乳酸脱氢酶、0.1-3g/L的防腐剂、1-30％的稳定剂、 0.1-5g/L的表面活性剂组成，其中所述缓冲液选自三羟甲基氨基甲烷- 盐酸缓冲液、三乙醇氨缓冲液、咪唑-盐酸缓冲液、双甘氨肽缓冲液、 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液、硼酸-硼酸钠缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸 -柠檬酸钠缓冲液、磷酸缓冲液或者磷酸盐缓冲液；所述的还原型辅酶 是还原型烟酰辅酶；所述螯合剂为18-冠醚-6，15-冠醚-5，Kryptofix221， Kryptofix222中的一种或几种；所述稳定剂为乙二醇、聚乙二醇、丙 二醇、甘油、牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸、硫基乙醇、甘露醇、山 梨醇、乳糖、海藻糖、黄素腺嘌呤二核苷酸和黄素单核苷酸中的一种 或几种；所述表面活性剂可以是选自下述成分的一种或多种：十六烷 基三甲基溴化铵，十六烷基氯化吡啶，十二烷基磺酸钠，十二烷基苯 磺酸钠，胆酸钠，Triton X系列，烷基、甜菜碱系列；所述反应加速剂 选自下述成分的一种或多种：镁离子，锰离子，钙离子；所述防腐剂 分子量在500-5000范围内，选自迭氮钠、迭氮锂、MIT、PC-300、烷 基糖苷；所述的再生酶循环系统包括葡萄糖脱氢酶-葡萄糖系统、葡 萄糖6磷酸脱氢酶-葡萄糖6磷酸系统、甘油脱氢酶-甘油系统、乳 酸脱氢酶-丙酮酸系统。

2.根据权利要求1的试剂盒，其特征在于所述烯醇式丙酮酸选自 单环烯醇式丙酮酸，三环烯醇式丙酮酸或者以上两种物质的盐类。

3.根据权利要求1或2的试剂盒，其特征在于所述腺苷二磷酸选 自腺苷二磷酸或者腺苷二磷酸盐。

4.根据权利要求1或2的试剂盒，其特征在于所述丙酮酸激酶来 自兔肌组织或者从微生物中提取。

5.根据权利要求1或2的试剂盒，其特征在于所述的再生酶循环 系统的反应速率小于主反应的速率，不干扰主反应。

6.根据权利要求1的试剂盒，其特征在于所述的还原型烟酰辅酶是 NADH、NADPH、thio-NADH或thio-NADPH。

7.根据权利要求6的试剂盒，其特征在于所述的还原型辅酶NADH 的吸光度在0.6-2.0之间，波长340nm，光径10mm。

8.根据权利要求1或2的试剂盒，其特征在于还包括由谷氨酸脱氢 酶和α酮戊二酸组成的除氨系统。

9.一种测定钾离子的液体双试剂试剂盒，其由下述成分组成：

试剂1

试剂2

和使用说明书。

10.一种测定钾离子的液体双试剂试剂盒，其由下述成分组成：

试剂1

试剂2

和使用说明书。