[发明专利]进境植物检疫性有害生物蔗扁蛾的快速鉴定方法无效
| 申请号： | 200910246161.8 | 申请日： | 2009-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN101787394A | 公开（公告）日： | 2010-07-28 |
| 发明（设计）人： | 黄国华;王星;廖力;徐淼锋;盛夏冰;李杰 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人： | 何为 |
| 地址： | 410128 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 进境 植物检疫 有害生物 蔗扁蛾 快速 鉴定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种进境植物检疫性有害生物蔗扁蛾的快速鉴定方法，其特征在于：该鉴定方法为以蔗扁蛾特异性引物CF720/CR1113对待测样品基因组DNA提取液进行PCR扩增，取PCR扩增液于0.5×TBE电泳缓冲液中在5V/cm电压下电泳后，置于溴化乙锭染色盒中染色，在紫外凝胶成像仪上观察扩增条带，判断该待测样品是否为检疫性有害生物蔗扁蛾；
其中：上述PCR扩增液为PCR反应体系经PCR反应参数后的PCR扩增产物，总反应体系为25μl，各成分组成如下：10×PCR Buffer 2.5μl、各2.5mM的dNTP Mixture 2μl、10pM的蔗扁蛾特异性引物CF720/CR1113各1μl、5U/μl的Taq DNA聚合酶0.13μl、50ng/μl的DNA提取液2μl、灭菌双蒸水16.37μl；PCR反应参数是：94℃预变性4min；94℃变性20s，62℃退火20s，72℃延伸30s共30个循环；72℃延伸5min；最后4℃保存；
上述蔗扁蛾特异性引物为：
正向引物CF720：5‘-ATATATTTTAATTTTACCAGGATTCGGT-3’
反向引物CR1113：5‘-TACTACATAGTAAGTATCGTGGAGAGAT-3’。
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