[发明专利]微生物同步发酵正十一烷生产十一碳二羧酸方法

权利要求书

1.一种微生物同步发酵正十一烷生产十一碳二羧酸方法，其特征在于所用的微生物为热带假丝酵母(Candida tropicalis)ly-1，该菌种已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为：CCTCC NO：M209223。

2.如权利要求1所述微生物同步发酵正十一烷生产十一碳二羧酸方法，其特征在于以热带假丝酵母(Candida tropicalis)ly-1为发酵种子，在以正十一烷为基质的培养基中同步发酵，生产α，ω-十一碳二元酸。

3.如权利要求2所述微生物同步发酵正十一烷生产十一碳二羧酸方法，其特征在于所说的发酵种子是由热带假丝酵母(Candida tropicalis)ly-1菌株经斜面培养、液体种子培养基培养，获得一级种子罐的种子；所使用的固体斜面培养基为10个巴林糖度的麦芽汁加2％琼脂制成；液体培养基为10个巴林的麦芽汁；混合液体种子培养基包含：KH₂PO₄6-12g/L，玉米浆3-8g/L，酵母膏3-8g/L，蔗糖13-38g/L，尿素3-6g/L，自来水配制，自然PH。

4.如权利要求2所述微生物同步发酵正十一烷生产十一碳二羧酸方法，其特征在于所说的同步发酵过程如下：

发酵培养基的主要组成为：碱金属磷酸盐6-14g/L、氯化钠0.5-2.0g/L、酵母膏1-6g/L、玉米浆3-5g/L、尿素0.5-2.5g/L、硝酸盐5-10g/L、蔗糖10-30g/L、消泡剂400-1200ppm，其中碱金属磷酸盐可从KH₂PO₄、NaH₂PO₄、K₂HPO₄和Na₂HPO₄中选一种，硝酸盐可从钾或钠盐中选一种；

发酵基质正十一烷烃和发酵培养基在混合发酵液中的用量比例为：10-45％(V/V)的正十一烷烃和55-90％(V/V)发酵培养基；

具体发酵操作方法为：

将发酵种子按发酵培养基量的15-25％(V/V)的用量，接入PH 5.5-9.0的含有10-45％(V/V)正十一烷烃的发酵培养基的混合液中，在PH 5.8-7.5之间，将上述混合物在25-32℃，通气发酵48-160小时；28小时内，PH控制在6.8以下，以菌体生长为主，产酸为副，此时菌株生长光密度OD达到0.4以上，产酸达到18-25g/L，在28-60小时，PH控制在7.3以下，产酸为主，菌体生长为副，此时OD达至0.8左右，产酸达到45-65g/L，从60小时以后，每隔4-6小时用NaOH溶液调一次PH至7.5-8.0，菌体量不再增加，而产酸量继续迅速增加，发酵完成后，将产生的二羧酸从发酵液中分离出来；在发酵过程中，补加正烷烃，使发酵液中正烷烃浓度始终≥5％(V/V)。