[发明专利]牛型结核菌素组分及活性的高效液相测定方法无效
| 申请号： | 200910259888.X | 申请日： | 2009-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN101718761A | 公开（公告）日： | 2010-06-02 |
| 发明（设计）人： | 张秀英;王在时;汪群杰;王宛;关孚时;陆连寿;戴志红;李翠;蒋卉 | 申请（专利权）人： | 中国兽医药品监察所 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所 11305 | 代理人： | 郑明 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 结核菌素 组分 活性 高效 测定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种牛型结核菌素组分及活性的高效液相测定方法，其特征在于：
1)取提纯牛型结核菌素溶液，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.9万国际单位的 溶液，精密量取10μL，注入液相色谱仪，色谱柱以的聚苯乙烯/二乙烯苯树脂5μm的 颗粒作为填充剂，流动相为乙腈-水-三氟乙酸分别为25∶75∶0.1，检测器为紫外检测器， 检测波长为271nm，流速为1.0mL/min，记录色谱图；
2)另取提纯牛型结核菌素国际标准品，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.9万国 际单位的溶液，精密量取10μL，注入液相色谱仪，色谱柱以的聚苯乙烯/二乙烯苯树 脂5μm的颗粒作为填充剂，流动相为乙腈-水-三氟乙酸分别为25∶75∶0.1，检测器为紫外 检测器，检测波长为271nm，流速为1.0mL/min，记录色谱图；
3)根据液相色谱图中结核蛋白和核酸的峰面积，按峰面积归一化法计算结核蛋白和核酸的 相对含量；根据标准品和供试品色谱图中结核蛋白的峰面积，按外标法计算牛型提纯结核 菌素的效价。
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