[发明专利]含稳定聚合酶的反应化合物的干组合物有效
| 申请号： | 200910263837.4 | 申请日： | 2009-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN101768616A | 公开（公告）日： | 2010-07-07 |
| 发明（设计）人： | T·哈斯林格;T·梅茨勒;A·佩塞尼;H·索贝克 | 申请（专利权）人： | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 林毅斌;郭文洁 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 稳定 聚合 反应 化合物 组合 | ||
1.制备反应化合物的可储存干组合物的方法，所述方法包括以下 步骤：
a)提供反应化合物的液体混合物，所述液体混合物包含引物、核 苷酸、Taq DNA聚合酶和第一稳定分子，其中所述第一稳定分子选自 酪蛋白和BSA，以及
b)通过降低所述液体混合物周围的压力干燥所述液体混合物，
其中所述反应化合物的干组合物可溶于水溶液中，
所述方法的特征在于步骤a)的所述反应化合物的液体混合物进一 步包含作为第二稳定分子的适配体，其中所述适配体选自序列SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10。
2.权利要求1的方法，其中所述反应化合物的液体混合物是含有 镁盐的缓冲水溶液。
3.权利要求1或2的方法，其中在步骤b)中所述液体混合物周围 的压力下降至低于600mbar。
4.权利要求3的方法，其中在步骤b)中所述液体混合物周围的 压力下降至低于400mbar。
5.权利要求4的方法，其中在步骤b)中所述液体混合物周围的 压力下降至200mbar。
6.权利要求1或2的方法，其中在步骤b)中所述干燥在室温下完 成。
7.权利要求1或2的方法，其中所述反应化合物的液体混合物进 一步包含检测探针。
8.权利要求7的方法，其中所述检测探针是荧光标记探针。
9.权利要求1或2的方法，其中所述反应化合物的液体混合物进 一步包含模板DNA。
10.反应化合物的干组合物，所述干组合物包含引物、核苷酸、 Taq DNA聚合酶、第一稳定分子和作为第二稳定分子的适配体，其中 所述第一稳定分子选自酪蛋白和BSA，所述适配体选自序列SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10以及所述干组合物室温下储存至少1周后重新 溶解时提供PCR活性。
11.权利要求10的反应化合物的干组合物，其中所述反应化合物 的干组合物进一步包含检测探针。
12.实施PCR扩增的方法，所述方法包括以下步骤：
a)通过加入水溶液重新溶解权利要求10-11任一项的反应化合物 的干组合物，并且
b)用包含重新溶解的反应化合物的水溶液来实施热循环方案。
13.权利要求12的方法，其中所述水溶液包含待通过热循环方案 扩增的靶核酸。
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