[发明专利]一种检测兔I型胶原蛋白基因的方法及试剂盒

权利要求书

1.一种非疾病诊断或治疗目的的检测兔I型胶原蛋白基因的方法，包括 如下步骤：

(ⅰ)用核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物、核苷酸序列如SEQ  ID NO.2所示的下游引物扩增生物样品；

(ⅱ)用探针对扩增产物进行检测，所述探针序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(ⅰ)所述扩增与步 骤(ⅱ)所述检测同时进行。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，采用实时荧光定量PCR 法进行步骤(ⅰ)所述扩增与步骤(ⅱ)所述检测。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，步骤(ⅱ)所述 探针为TaqMan探针。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述实时荧光定量PCR 反应程序为：95℃10min；95℃30sec；58℃1min；72℃1min为一个循 环，设定45个循环。

6.一种检测兔I型胶原蛋白基因的试剂盒，其特征在于，包含核苷酸序 列如SEQ ID NO.1所示的引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的引物，以 及核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的探针。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，还包含用于检测兔GAPDH基因的引 物和探针；其上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，下游引物的核苷 酸序列如SEQ ID NO.5所示，探针序列如SEQ ID NO.6所示。

8.根据权利要求6或7所述的试剂盒，其特征在于，所述探针为TaqMan 探针，其5’端标记6-FAM、TET、HEX、TAMRA、ROX、CY5、CY3、JOE、 Texas Red其中一种，3’端标记TAMRA、BHQ-1、Eclipse、Iowa Black其 中一种。

9.检测兔I型胶原蛋白基因的引物，上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1 所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。