[发明专利]防治小麦根部病害的解淀粉芽孢杆菌EA19及其制剂

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)EA19，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.M 209316。

2.根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌EA19，其特征在于：所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)EA19系从中国科学院武汉植物园采得的“一年蓬”(Erigeron annuus(L.)Pers)健康叶片，采用组织研磨平板筛选分离法分离得到的，为一种植物的内生细菌。

3.根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌EA19，其特征在于：该菌株为短杆状，革兰氏阳性，周生鞭毛，内生产芽孢，在NA培养基上形成椭圆形、不透明乳白色菌落，表面粗糙，略凹陷；经VITEKK 2 Systems Version：03.01全自动微生物鉴定系统鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)或枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.subtilis)，采用特异性引物PCR扩增进一步被鉴定为解淀粉芽孢杆菌；经16S rRNA基因测序鉴定：其为一种新的解淀粉芽孢杆菌。

4.一种根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌EA19的制备方法，其特征在于：制备过程如下：

(1)制备植物组织稀释液：称取采摘的“一年蓬”植物健康叶片1克，用70％(重量百分数)的酒精表面消毒30-45s、次氯酸钠消毒60-90s，然后将其剪碎后放入已灭菌的研钵中，加入5毫升的无菌水，在超净工作台上充分研磨，再将研磨液转移入EP管中，以8000转/分钟的离心速率离心5-10分钟，吸取出上清液，用无菌水将上清液分别稀释为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5和10^-6等浓度梯度液；

(2)涂菌：吸取各浓度稀释液1毫升，加入NA培养基平板中，用灭菌棉签涂匀，在30℃恒温箱内培养24-36小时。所述的NA培养基平板组成为：牛肉浸膏3克，蛋白胨5克，葡萄糖10克，酵母浸膏1克、琼脂15克，蒸馏水1000毫升，PH 7.0；

(3)挑菌：待NA培养基平板长出菌落后，根据形态挑取单菌落于12毫升NA液体培养基中，180转/分钟，30℃恒温振荡24-36小时；

(4)纯化：在NA固体平板上，采用平板划线法对培养液进行反复划线，直至获得纯培养，菌株命名为EA19；

(5)菌株保存：将纯化得到的菌株加入灭菌的盛有甘油的试管中-20℃保存，甘油的终浓度为15％。

5.一种根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌EA19制成的菌剂。

6.根据权利要求5所述的菌剂，其特征在于：所述的菌剂为颗粒菌剂型、可湿性粉菌剂型或水菌剂型。

7.一种根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌EA19在小麦病害防治中的应用，其特征在于所述的小麦病害为小麦根部病害，包括小麦根腐病害、小麦根腐叶枯病害、小麦全蚀病害、小麦白绢病害或小麦纹枯病害。