[发明专利]防治小麦根部病害的解淀粉芽孢杆菌EA19及其制剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)以及利用该解淀粉芽孢杆菌生产的菌剂和防治小麦根部病害的应用。该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 209316，菌株名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)EA19，属生物技术领域。 

背景技术

随着全球对资源和环境的广泛关注，利用植物内生菌或植物内生菌分泌的次生物质来拮抗或杀灭植物的有害病原物，是当前生物农药开发领域的一个新方向。小麦根腐病、全蚀病、白绢病和纹枯病，在河南、河北、山东、江苏、湖北及其他小麦主产区都有大面积发生，是危害我国小麦生产最主要的土传根部病害，其可导致一般田块减产10％～30％，重病田块减产50％以上，甚至颗粒无收。近年提倡的保护性耕作制度进一步加重了小麦土传根部病害的危害，这已成为一些麦区生产上的突出问题。种植抗病品种是一种防治这些病害最经济有效的方法，然而目前尚无防治小麦根部病害的抗病品种。因此，当前施用化学农药仍是防治这些病害的最主要方法，但其存在污染严重，与环境相容性差，病原菌容易产生抗药性等诸多问题，且这些问题日益突出。开发新型的无公害农药是解决小麦土传病害的迫切需要。 

芽孢杆菌属细菌，其分布广泛，好氧或兼性厌氧，能形成芽孢(内生孢子)，是土壤或植物体表及内部一类重要的微生物种群，一般为革兰氏阳性。芽孢杆菌形成的芽孢对热、紫外线、放射线和化学物质等都有很强的抵抗力，因此极有利于芽孢生防制剂的生产、剂型加工和芽孢杆菌在环境中的存活、定殖与繁殖。同时，芽孢杆菌作为自然界广泛存在的一种植物内生非致病细菌，对人畜无害、对环境无污染、易于繁殖和发酵、适应环境能力强，且其生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等多种活性物质对植物的致病菌或内源性感染的致病菌有明显的抑制作用，因此，芽孢杆菌在生物防治植物病害中具有重要开发价植。目前，生产上登记的用于防治植物病害的芽孢杆菌主要有：枯 草芽孢杆菌(B.subtilis)、腊样芽孢杆菌(B.cereus)、短小芽孢杆菌(B.pumillus)和多粘芽孢杆菌(B.polymyma)等。 

解淀粉芽孢杆菌是芽孢杆菌的一个种。在酶工业中，该菌是用于生产α-淀粉酶的主要菌种；在食品工业中，芽孢杆菌能很好地抑制引起多种食品腐烂的镰刀菌、曲霉、青霉和毛霉等致病菌的生长，亦具有广阔的应用前景。在农业中，尽管已有解淀粉芽孢杆菌对多种病原真菌具有活性的报道，但目前为止，解淀粉芽孢杆菌制成生防制剂用于防治植物病害的报道较少。李红玉等(专利公开号CN1952116A)公开了一种从土壤中分离的解淀粉芽孢杆菌I7及其在桃炭疽病菌、梨黑斑病菌、苹果褐腐病菌、锐顶镰刀菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌、辣椒黑腐病菌、黄瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、茄子早疫病菌、立枯丝核菌、小麦根腐病菌、马铃薯丝核菌、马铃薯早疫病菌、马铃薯晚疫病菌、西瓜霜霉病等病害防治中的应用。姬广海等(专利公开号CN1792167A)公开了一种解淀粉芽孢杆菌(保藏号CGMCC NO.1553)及其在防治魔芋细菌性软腐病中的应用。美国专利US 6960342中公开了一种从台湾百合地土壤中分离得到的解淀粉芽孢杆菌，其制成的生物制剂可用于椭圆葡萄孢引起的葡萄灰霉病的防治。关于用解淀粉芽孢杆菌防治小麦根部具体病害的研究，国内外尚无报道。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)EA19及其制备方法，以及利用解淀粉芽孢杆菌EA19制成的菌剂，解淀粉芽孢杆菌EA19在小麦根部病害防治中的应用。 

已由中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC NO.M 209316，该菌株为一种植物内生菌。 

为解决本发明的技术问题，所提供的技术方案为： 

提供一种解淀粉芽孢杆菌EA19，已于2009年12月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是湖北省武汉市武汉大学，保藏号为CCTCC NO：M 209316。 

所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)EA19系从中国科学院武汉植物园 采得的“一年蓬”(Erigeron annuus(L.)Pers)植物健康叶片中，采用组织研磨平板筛选分离法分离得到的，为一种植物的内生细菌。 

解淀粉芽孢杆菌EA19菌株的制备过程如下：