[发明专利]用改良K-N法组份A+Ⅰ上清制备富含α1-抗胰蛋白酶组份的方法

权利要求书

1.一种从改良K-N法A+I上清中提取富含α₁-抗胰蛋白酶组份的方法，其特征在于：通过调整改良K-N法组份A+I上清的蛋白浓度、pH、乙醇浓度、电导、温度，制备富含α₁-抗胰蛋白酶的组份；其中蛋白浓度：1.6g/100ml、pH：5.10、乙醇浓度：18％、电导：8.5ms、温度：-5℃；

所述方法包括如下步骤：

a、用pH4.0醋酸盐缓冲液调节体积为V₀、蛋白浓度为P₀的改良K-N法组份A+I上清至pH为5.00～5.20；

b、将冷却至-5℃的NaCl/乙醇混合液加入改良K-N法组份A+I上清，所使用的NaCl/乙醇混合液的体积记为V_B；V_B＝V_T-V₀，所述NaCl/乙醇混合液中乙醇浓度为18％；

c、确认体系的pH为5.10、温度为-5℃及电导为8.5ms，最终蛋白浓度P₁为1.6g/100ml，此时体系的总体积记为V_T；

d、将体系于温度-5℃搅拌1小时，5℃静置过夜后离心收集沉淀，即得富含α₁-抗胰蛋白酶的组份；

其中：上述V0为待处理的改良K-N法组份A+I上清初始体积，单位L；

P₀为待处理的改良K-N法组份A+I上清蛋白浓度，单位g/100ml；

P₁为最终蛋白浓度，单位g/100ml；

V_B为补加入改良K-N法组份A+I上清的NaCl/乙醇混合液体积，单位L；

V_T为步骤c处理后体系的总体积，单位L；

所述改良K-N法A+I上清是用改良K-N法处理血浆得到的，其中改良K-N法的参数如下：乙醇浓度：20％，pH：6.2，温度：-5℃，蛋白浓度：3％。