[发明专利]鸡眼睛药材中鞣花酸类成分的含量测定方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种鸡眼睛药材中鞣花酸类成分的含量测定方法，属于对中药材 进行定量检测的技术领域。

背景技术：

鸡眼睛为省沽油科植物野鸦椿Euscaphis japonica(Thunb.)Dippel带花 或果的枝叶，其原植物分布江南各省和云南东北部，收载于《贵州省中药材、民族药材质量 标准》(2003年版)，《四川中药志》用其果实或种子。鸡眼睛为贵州少数民族用药，性辛 、甘、平，具理气止痛，消肿散结，祛风止痒的功效，现为国家食品药品监督管理局药品标 准WS-10108(ZD-0108)-2002(试行)血脉通胶囊中的主要药材之一。

血脉通胶囊(WS-10108(ZD-0108)-2002)具有活血化瘀，通经活络功能，临床用于冠 心病、心绞痛，心血瘀阻证，已获得国家发明专利一项(ZL02133416.1)。但是文献调研发 现关于鸡眼睛药材的研究较少，基础研究薄弱，缺乏可靠的定性定量方法和可供使用的对照 品，《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003年版)中仅对其进行了简单的薄层鉴别。 因此以鸡眼睛为主药开发的制剂血脉通胶囊，其质量控制标准较为简单，特别是未对处方 主药鸡眼睛进行含量测定等项目的检测，因而不能很好地确保其临床用药的有效性及安全性 ，需要进一步研究，提高其质量控制标准。

发明内容：

本发明的目的在于：提供一种鸡眼睛药材中鞣花酸类成分的含量测定方法。本发明在同 一色谱条件下对鸡眼睛药材中的多种成分同时进行含量测定，使得鸡眼睛药材中鞣花酸类成 分的含量测定方法更具整体性、特征性和稳定性，为有效控制鸡眼睛药材的质量以及鸡眼睛 药材的再开发应用奠定了基础。

本发明所述鸡眼睛为省沽油科植物野鸦椿Euscaphis japonica(Thunb.)Dippel带花 或果的枝叶。

本发明是这样实现的：鸡眼睛药材中鞣花酸类成分的含量测定方法为：采用高效液相色 谱法或超高效液相色谱法，在同一色谱条件下对鸡眼睛药材中所含的鞣花酸、3，3′-二甲氧 基鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β -D-葡萄糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-α-D-阿拉伯糖苷五个成分中的至少两个成分 同时进行含量测定。

所述含量测定方法是以鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′ -O-β-D-木糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸 -4′-O-α-D-阿拉伯糖苷五种对照品中的至少两种为对照，以乙腈∶H₃PO₄水溶液＝6～100∶ 94～0为流动相梯度洗脱的高效液相色谱法或超高效液相色谱法。

具体的含量测定方法包括以下步骤：

(1)色谱条件：色谱柱为BEH C18柱；乙腈-H₃PO₄水溶液梯度洗脱；柱温为20℃～50℃ ；检测波长为220～480nm；

(2)对照品溶液的制备：分别称取鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸、3，3′-二甲氧基 鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3，3′-二甲氧 基鞣花酸-4′-O-α-D-阿拉伯糖苷对照品中的至少两种，加甲醇溶解后置同一容量瓶中，加 甲醇稀释至刻度，得对照品溶液；

(3)供试品溶液的制备：取鸡眼睛药材粉末适量，精密称定，加甲醇适量，提取2～8h ，浓缩后用甲醇稀释，得供试品溶液；

(4)测定方法：按照步骤(1)所述色谱条件测定，即得。

前述步骤(1)的色谱条件与系统适用性试验为：

仪器：Waters ACQUITY UPLC色谱仪；

色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱；

流动相：A为乙腈，B为0.1％～1％H₃PO₄水溶液，按A∶B＝6～100∶94～0进行梯度洗脱；

流速：0.2mL/min；

柱温：40℃；

检测波长：235～260nm；

进样量：1μL；

理论塔板数计算均在160000以上。