[发明专利]基于SRAP标记的茄子亲缘关系的检测方法

权利要求书

1.一种基于SRAP标记的茄子亲缘关系的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，提取茄子的DNA；

步骤二，SRAP-PCR扩增，得到扩增产物；

步骤三，对扩增产物电泳，得电泳凝胶；

步骤四，对电泳凝胶进行银染显色；

步骤五，对电泳结果结合形态性状和系谱关系来区分各个品种茄子间的亲缘关系。

2.根据权利要求1所述的基于SRAP标记的茄子亲缘关系的检测方法，其特征是，所述的结合形态性状和系谱关系来区分，是指：如果这两者相同，则是同一种材料，或来自于同一祖先，反之，则没有亲缘关系。

3.根据权利要求1所述的基于SRAP标记的茄子亲缘关系的检测方法，其特征是，步骤二中，所述SRAP-PCR扩增具体为：采用10μL反应体系进行SRAP扩增，其中，10μL反应体系具体为：2.0mmol·L-1 MgCl2，200μmol·L-1 dNTPs，0.5μmol·L-1引物，Taq聚合酶0.5U，40～50ng模板DNA，用重蒸水调整终体积至10μL，反应混合物用20μL石蜡油覆盖；PCR扩增程序为：94℃3分钟；94℃45秒，35℃45秒，72℃1分钟，5个循环；94℃45秒，50℃45秒，72℃1分钟，35个循环；最后72℃7分钟。

4.根据权利要求1或3所述的基于SRAP标记的茄子亲缘关系的检测方法，其特征是，步骤二中，所述SRAP-PCR扩增所用引物选自以下引物组合中的多种：

  OD8GA34  OD26GA34  OD10GA19  SA7GA5  OD12GA5  SA7GA12  OD15GA11  SA8GA3  OD15GA33  SA14GA2  OD22GA19  SA17GA5  OD22GA34  SA18P18  OD26GA30  SA21GA5

其中，所述引物具体如下表所示：

  引物名称  5’-3’  引物名称  5’-3’  OD8  CACAAGTCGCTGAGAAGG  GA2  TTGAACTGGCAGAAAGGGT  OD10  AGGAGGGAAAGGTCTGGT  GA3  TCATCTCAAACCATCTACAC  OD12  TTGAATATCCAGTGTAAGGTT  GA5  GGAACCAAACACATGAAGA

  引物名称  5’-3’  引物名称  5’-3’  OD15  GCGAGGATGCTACTGGTT  GA11  CATTGTGGTGGTTATTGTCA  OD22  TACACCAGCCAAGGATGC  GA12  CACCACCATCATCATATCTT  SA7  CGCAAGACCCACCACAA  GA19  TTAGGGCAATAAAACATGGT  SA8  GGATGAAGCGACAAGTC  GA30  CTCTCCACCGCACATATC  SA14  TTACCTTGGTCATACAACATT  GA33  GTTATGGGAAATTACGTGAG  SA17  ATAAGAATCAGCAGACGCAT  GA34  CCAAATGGAACAAAATGATG  SA18  ACGAGTGCGGAAAGTGG  PII18  AAAGCGATCAAAGCGGGTG  SA21  GAATGCAGGAGAACACGTT