[发明专利]欧美杨组织培养获得再生植株的方法无效
| 申请号： | 200910311186.1 | 申请日： | 2009-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN101715731A | 公开（公告）日： | 2010-06-02 |
| 发明（设计）人： | 周洲;李永丽;陈迪新;陈双臣;刘爱荣 | 申请（专利权）人： | 河南科技大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 陈浩 |
| 地址： | 471003 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 欧美 组织培养 获得 再生 植株 方法 | ||
1.欧美杨组织培养获得再生植株的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤
⑴无菌外植体的获得：以欧美杨健康嫩枝为材料，将叶柄清洗消毒获得无菌叶柄外植体；
⑵愈伤组织的诱导分化：将无菌叶柄接种于诱导培养基上，两周后开始分化出大量不定芽，14-20天继代培养一次；
⑶抽茎及壮苗：将丛生芽连同外植体转接到抽茎培养基上，抽茎培养至丛生芽高于2cm后，将丛生苗转移至壮苗培养基上，使丛生苗生长为茎干健壮的无根苗；
⑷生根培养：将无根苗单株接种到生根培养基中，培养获得主根粗壮，侧根丰富的幼苗；
所述的诱导培养基为MS+TDZ 0.025-0.1mg/L+6-BA 0.025-0.1mg/L+NAA 0.02-0.1mg/L+蔗糖20-40g/L；抽茎培养基为MS+KT 0.5-1mg/L+GA3 1-4mg/L+果糖20-40g/L；壮苗培养基不含植物激素的MS+蔗糖20-40g/L；生根培养基：1/2MS+IBA 0.02-0.1mg/L+IAA 0.02-0.1mg/L+活性炭1-5mg/L+蔗糖20-40g/L。
2.根据权利要求1所述的欧美杨组织培养获得再生植株的方法，其特征在于：所述培养基均含4-6g/L的琼脂，pH值为5.6-6.2。
3.根据权利要求1所述的欧美杨组织培养获得再生植株的方法，其特征在于：所述的组织培养的培养温度应控制在24-26℃，光照强度为1500-2000lx，光照时间为12-16小时。
4.根据权利要求1所述的欧美杨组织培养获得再生植株的方法，其特征在于：所述的叶柄清洗消毒的方法包括叶柄于流动的自来水下冲洗后，置于超净工作台中用70%-75%乙醇处理30-50s，无菌水冲洗除去残留物；再用0.5-1g/L氯化汞溶液消毒3-6min，最后用无菌水冲洗除去残留物，获得无菌叶柄外植体。
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