[发明专利]一种从巴戟天药材中提取分离水晶兰苷单体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从植物中分离化合物单体技术领域，尤其是一种从巴戟天药材中提取分离 水晶兰苷单体的方法。

背景技术

巴戟天是著名的“南药”，为茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How的干燥根 。性甘、辛微温，具有补肝肾、强筋骨、祛风湿的功效，用于治疗阳痿遗精，宫冷不孕， 月经不调，少腹冷痛，风湿痹痛等症。巴戟天药材中含有包括大黄素甲醚、甲基异茜草素 -1-甲醚、1-羟基蒽醌、1-羟基-2-甲氧基蒽醌等蒽醌类成分，葡萄糖、甘露糖、巴戟素等 多种糖类成分，水晶兰苷、四乙酰车叶草苷等环烯醚萜苷类成分，还含有8种人体必需氨 基酸，β-谷甾醇以及24-乙基胆甾醇等甾体化合物。药理研究表明，巴戟天属植物中环烯 醚萜具有抗菌、抗氧化、抗诱变、抗肿瘤、消炎镇痛等广泛作用，其中环烯醚萜苷枛水晶 兰苷是其特征性成分，在5年生药材中含量约为1.2％，结构式如下：

《中国药典》2005年一版中收载了巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天，但均只规定做定性 鉴别对其进行质量控制，无含量检测要求。随着近年来研究的深入，发现巴戟天中环烯醚 萜苷类成分具有显著生物活性，已引起人们的广泛关注，尤其是其特征性成分水晶兰苷具 有较强的抗炎、镇痛作用这一研究成果，从药效学角度阐明了水晶兰苷作为巴戟天祛风湿 的物质基础。因此，为加强对巴戟天及其同属药材及制剂的质量控制，仅依靠定性鉴别显 然是不够准确的，需要对其特征性成分如水晶兰苷等进行定量检测。但目前市面上尚缺乏 可用作含量检测对照品的高纯度水晶兰苷单体。而且现有技术在水晶兰苷分离纯化手段上 多采用反复硅胶柱层析等传统方法，生产周期长，且存在水晶兰苷与糖分不易分离的情况 ，使得产品纯化困难、纯度不高，其质量和数量难以满足需要。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中无高纯度水晶兰苷的分离制备方法、因而缺少 高纯度水晶兰苷单体化合物等问题，提供一种从巴戟天药材中提取分离水晶兰苷单体的方 法。该方法操作简便，分离效率高，工艺稳定，成本低廉，可实现大量水晶兰苷单体的高 纯度分离制备，得到的水晶兰苷单体纯度高，可达到98％以上。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种从巴戟天药材中提取分离水晶兰苷单体的方法，包括下述主要步骤：

A、乙醇溶液提取：

将巴戟天药材切成2-5mm左右的段，装入提取容器中，加入5-8倍量(ml/g，即按照每 g药材加入溶剂5-8ml计算)的体积百分比为50％-85％的乙醇溶液，于35℃-55℃水浴加热提 取2-4次，每次1-2h，过滤，弃去药渣，收集过滤液于35℃-50℃水浴减压浓缩至无醇味， 得提取浓缩液，进行下述步骤B。

本步骤通过含醇水溶液加热提取、浓缩，所得的药材有效成分提取液中主要含水晶兰 苷、蒽醌类和糖类等成分。

B、乙酸乙酯萃取：

向步骤A所得的提取浓缩液中加入体积比0.7-1.5倍量的乙酸乙酯，萃取2-4次，静置 分层，收集下层水相，进行下述步骤C。

本步骤中，由于蒽醌类成分更易溶于乙酸乙酯中，而水晶兰苷等在乙酸乙酯中溶解度 较小，因而，采用乙酸乙酯萃取可较完全的除去提取浓缩液中的蒽醌类成分(可单独收集 、另行分离获得蒽醌类单体产品)，水晶兰苷和糖类等成分保留在下层水相中，为后续分 离减少杂质干扰，并同时起到富集水晶兰苷的作用。

C、正丁醇萃取：

向步骤B所得的萃取后下层水相中，加入体积比2-4倍量的正丁醇萃取3-6次，弃去水 相，合并正丁醇相，将正丁醇相于50℃-65℃水浴减压浓缩至干，得到的干品为水晶兰苷 半成品，进行下述步骤D。

本步骤中，由于水晶兰苷在正丁醇中具有更大的溶解度，而糖类等成分更易溶于水中 ，因而，用正丁醇萃取可较完全的将水相中的水晶兰苷萃取出来，将糖类等其他杂质留在 水中，起到除杂和富集水晶兰苷的作用。

D、过滤进一步除杂：

将步骤C所得的除杂富集后的水晶兰苷半成品用≤30％的甲醇(包括体积百分比≤30％的 甲醇水溶液和纯水，下同)作为溶剂溶解，溶剂用量按固体物重量∶溶剂体积＝1g∶(4-8)ml计 算，溶解后的溶液用孔径0.22um-0.45um的水系膜过滤，得澄清透明滤液；再进行下述步 骤E。