[发明专利]构建用于抗利什曼病和结核病的疫苗开发的DNA嵌合体

权利要求书

1.一种新的DNA构建体的重组嵌合体，其具有一起克隆到DNA疫苗载体pVAX-1中自我切割肽的两侧的结核分枝杆菌的esat-6区域和杜氏利什曼原虫的驱动蛋白区域，其中所述嵌合构建体有效地连接至转录启动子，因此能够在哺乳动物细胞内自我复制和表达。

2.根据权利要求1所述的新的DNA构建体的重组嵌合体，其提供了制药学上可接受的免疫刺激制备物，其中包括来自杜氏利什曼原虫的驱动蛋白运动结构域和来自结核分枝杆菌的esat-6结构域的DNA序列。

3.根据权利要求1所述的新的DNA构建体的重组嵌合体，其提供了当经皮途径施用有效量的药物组合物时刺激温血动物免疫应答的方法。

4.根据权利要求1所述的新的DNA构建体的重组嵌合体，其中它产生了针对两个候选基因的强烈TH-1型免疫应答。

5.根据权利要求1所述的新的DNA构建体的重组嵌合体，其中它可用作疫苗候选物，以同时治疗和控制内脏利什曼病和结核病。

6.制备新的DNA构建体的重组嵌合体的方法，其包括：

a.应用Promiscuous MHC Class-1 Binding Peptide PredictionServers分析预测的驱动蛋白运动结构域和esat-6结构域的蛋白质序列。

b.将所述驱动蛋白运动结构域和esat-6结构域进行编码基因扩增。

c.将驱动蛋白esat-6基因区域克隆至载体中，用于序列分析。

d.通过在pVAX-1载体中定向克隆产生嵌合构建体。

e.使用无细胞翻译系统，将来自所述克隆的驱动蛋白运动结构域和esat-6结构域进行体外表达分析以及免疫原性研究，使用上述构建体进行脾细胞增殖和细胞因子的研究。