[发明专利]sFlt-1:血管生成因子络合物的测定

说明书

相关专利申请的交叉引用

本专利申请要求于2008年1月7日提交的美国临时申请No.61/019,351的优先权。

关于联邦资助研发项目的声明

不适用。

技术领域

本发明涉及免疫分析和体外诊断，更具体地讲涉及先兆子痫中包括的sFlt-1：血管生成因子络合物的测定。

发明背景

先兆子痫是一种高血压、浮肿和蛋白尿综合征，在孕妇中的患病率为5至10％，并会导致高母儿发病率和死亡率。先兆子痫每年在全世界造成200,000例孕产妇死亡。先兆子痫的临床症状通常出现在怀孕20周后，通常在妇女血压常规评估和尿样中蛋白存在的检测过程中发现。然而，这类临床评估对该综合征的早期诊断是无效的。当临床评估不能提供有效信息时，如果能够评估先兆子痫发展的可能性，和/或能够在妊娠早期诊断先兆子痫，和/或能够在发病阶段诊断先兆子痫，则可以进行早期干预，并降低孕妇和发育中的胎儿出现并发症的风险和死亡率。

目前对于先兆子痫还没有已知的治疗方法。先兆子痫的严重程度可以为轻度至危及生命。妊娠并发症包括肾衰竭、HELLP综合征(溶血、肝酶升高和血小板减少)、肝衰竭、癫痫合并脑水肿，少数情况下还会导致死亡。潜在的胎儿并发症包括低出生体重、早产和死亡。轻度先兆子痫可通过卧床休息和频繁监测进行治疗。对于中度至重症病例，建议住院治疗，并开具降血压药物或抗癫痫药物以预防癫痫。如果病情危及母婴生命，应终止妊娠并提前分娩。

最近有人对与先兆子痫相关的分子机制进行了综述(Mutter andKarumanchi，Microvascular Research 75：1-8，2008(Mutter和Karumanchi，微血管研究，第75卷第1-8页，2008年))。如Mutter和Karumanchi所指出，据信内皮功能障碍会促成先兆子痫的临床综合征(Roberts and Cooper，Lancet 357：53-56，2001(Roberts和Cooper，柳叶刀，第357卷第53-56页，2001年))。该疾病的许多症状可能是因内皮功能异常(包括动脉对外源和内源刺激的高反应性、与肾小球通透性增加相关的蛋白尿、脑水肿和中枢神经系统渗透性增加、以及导致HELLP综合征的血管血栓)引起的(Roberts，Semin Reprod Endocrinol 16：5-15，1998；Roberts and Cooper，Lancet 357：53-56，2001(Roberts和Cooper，柳叶刀，第357卷第53-56页，2001年))。因此，人们一直在积极探寻引起或促成内皮功能障碍的循环因子。

胎儿和胎盘的正常发育由若干生长因子介导。其中一个生长因子是血管内皮生长因子(VEGF)。VEGF是内皮细胞特异性有丝分裂原、血管生成诱导因子和血管通透性介导因子。还已发现，VEGF对肾小球毛细血管的修复发挥着重要作用。VEGF作为同源二聚体与两种同源跨膜酪氨酸激酶受体-fms样酪氨酸激酶受体(Flt-1)(也称为血管内皮生长因子受体1或VEGF-R1)和激酶结构域受体(Flk/KDR)(也称为血管内皮生长因子受体2或VEGF-R2)中的一种结合，这两种受体在来自许多不同组织的内皮细胞中差异表达。Flt-1(但不是Flk/KDR)由有助于胎盘形成的滋养层细胞高表达。胎盘生长因子(PlGF)是VEGF家族的成员，它也与胎盘发育有关。PlGF由细胞滋养细胞和合体滋养细胞表达，并能够诱导内皮细胞增殖、迁移和活化。PlGF作为同源二聚体与Flt-1受体(但不是Flk/KDR受体)结合。PlGF和VEGF均有助于对胎盘发育至关重要的促有丝分裂活性和血管生成。

人们已在人脐静脉内皮细胞的培养基中鉴定出一种可溶形式的Flt-1受体(sFlt-1)，并随后证实了在胎盘组织中的体内表达。sFlt-1是无跨膜域和胞质域的Flt-1受体的剪接变体(He等人，Mol Endocrinol 13：537-545，1999；Kendall和Thomas，Proc Natl Acad Sci USA 90：10705-10709，1993)。