[发明专利]乙型肝炎病毒(HBV)的疏水性修饰的preS衍生肽及它们作为HBV和HDV进入抑制剂的使用

说明书

技术领域

本发明涉及乙型肝炎病毒(HBV)的疏水性修饰的preS衍生肽，该preS衍生肽来源于HBV preS共有序列并且其N末端优选被酰基化以及其C末端可选地被修饰。这些HBV的疏水性修饰的preS衍生肽是非常有效的HBV进入抑制剂以及HDV进入抑制剂，因此适用于HBV和/或HDV感染的抑制、原发HBV和/或HDV感染的预防以及(慢性)乙型肝炎和/或丁型肝炎的治疗。本发明进一步涉及包含这些HBV的疏水性修饰的preS衍生肽的药物和疫苗组合物。

背景技术

现今，大约20亿人携带HBV血清标记。他们中的大约4亿是被HBV慢性感染的。根据疾病控制中心(CDC)，如果他们没有接受适当的治疗(1)，15-25％的慢性HBV感染的人在十年内有发展成肝细胞癌(HCC)的倾向。HBV相关的肝细胞癌(HCC)预测性很差并且因此HBV被世界卫生与健康组织(WHO)归类为最重要的天然存在的人致癌因子。尽管有预防疫苗，在未来的十年中感染的人数仍将上升，这是由于世界人口的增加和在贫穷国家中预防的限制。

在工业国家，HBV基本上是通过肠胃外的途径传播。90-95％的被急性感染的、有免疫能力的个体清除病毒，因此获得了终生的免疫防护。他们当中大约5-10％的人发展成乙型慢性肝炎(在德国300,000-500,000人)。相反，在高流行区域，特别是在中非和东亚，传播的主要模式是垂直地从母亲至儿童。令人遗憾的是，没有完全免疫能力的儿童的感染导致了90-98％的慢性疾病过程。因此乙型肝炎相关的肝细胞癌在这些国家中的许多中是最普通的恶性肿瘤。

当前被认可的治疗乙型慢性肝炎病毒(HBV)感染的治疗方案，或者是针对已经建立感染后的病毒基因组的复制步骤(Lamivudine，Adefovir，Entecavir)或者是作为免疫系统的调节剂(干扰素α)。令人遗憾的是，只有10-25％的病人在这种治疗上保留着持久的病毒反应，尤其反映了核苷酸抗性突变体的快速选择。尽管预防性疫苗的有效性，但发展新的以迄今为止不受影响的复制步骤如病毒进入为靶点的治疗方法仍是极为重要的。

病毒进入的特异性抑制是吸引人的治疗概念，以便控制和最终消除急性和慢性感染。对于HIV，通过由36个氨基酸组成的gp41蛋白衍生肽(Fuzeon)，防止了病毒和细胞膜的融合(2)，成功地实现对病毒进入的干扰。

尽管预防疫苗和逆转录酶(RT)抑制剂的有效性，全世界HBV感染的人数和HBV相关的死亡人数(当前每年大约500,000人)还在增加。大约三分之二的原发性肝癌可归因于持续的HBV感染(3)。

目前治疗遵循两个策略：(i)干扰素(IFNα)治疗调节针对HBV的免疫反应并显示了直接抗病毒效果，这在大约30％的被治疗的病人中导致长时间的临床益处，但没有根除病毒；(ii)病毒逆转录酶抑制剂的给药抑制病毒复制并且在一年的治疗后伴随着显著的生物化学和组织的改进。然而，长时间的治疗与抗性病毒株的出现是相关的(4)。

HBV是哺乳动物和鸟类的小包膜DNA病毒家族的原型(5)。HBV的包膜包括三种称为L(大的)、M(中等的)、以及S(小的)蛋白(参见图1A)。它们共有具有四个跨膜区的C-末端S结构域。M和L蛋白带有另外的N末端延伸的55个氨基酸(preS2)和取决于基因型的107或118个氨基酸(preS1)(参见图1B)。在病毒粒子中，L、M和S的化学计量比是大约1∶1∶4，同时非常充足分泌的非传染性的亚病毒微粒(SVPs)几乎唯一地包含S蛋白以及仅仅微量的L蛋白(6)。在合成期间，L的preS1结构域被豆蔻酰基化并且被移位通过内质网(ER)。该修饰对于HBV的感染性是必需的(7，8)。

HBV感染早期情况的研究被限制，因为直到最近既没有细胞培养系统也没有小动物模型(9)。HBV易感染的HepaRG细胞系的发展促进了HBV进入的系统研究并且导致了包膜蛋白衍生的进入抑制剂的发现(10)。

此外，至今为止还没有针对HDV感染的有效治疗，HDV是一种利用HBV包膜蛋白进入肝细胞中的卫星拟病毒(satellite virusoid)(15，17，20)。在本领域中需要提供针对HDV感染的有效治疗。

因此，本发明的目的是提高方法和手段用于抑制、预防和/或治疗HBV感染和现有技术存在的其他HBV相关的疾病，并且因此本发明的目的是提供改进的方法和手段，允许有靶点的和有效的抑制、预防和/或治疗HBV感染和HBV相关的疾病。

本发明的进一步的目标是提供方法和手段用于抑制、预防和/或治疗HDV感染和HDV相关的疾病。