[发明专利]通过基因疗法治疗眼疾病的方法

说明书

技术领域

本发明提供通过给有需要的受试者施用编码ABCR蛋白(“视网膜ATP结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter-retinal)”)的腺相关病毒(adeno-associated viral)载体来治疗与ABCA4基因中的突变相关的疾病的方法。本发明还包括用于该方法的基因构建体和腺相关病毒载体。

发明背景

Stargardt病(Deutman，A.F.a.H.C.B.2001.Macular dystrophies.St Louis，Missouri，Usa：Schachat，A.P.1210-1257 pp.)(STGD)是包括在黄斑变性类疾病中的常染色体隐性遗传病，其在于双眼的中心凹中视锥细胞的进行性丧失，从而导致不同水平的中心视力减退。在眼底镜检查时，常观察到在黄斑周围存在黄色雀斑，称为黄色斑眼底(fundus flavimaculatus)病症。其通常在7至12岁之间发生，估计流行率为1/10,000个体，这使得该疾病成为在生命的第一和第二个十年中影响感光细胞的遗传性黄斑变性的首要原因，并且相应于所有视网膜营养不良(retinian dystrophy)的7％。该疾病最初被描述为常染色体隐性遗传病，但存在一些显性模式的报道病例。隐性模式包括90％以上的病例，是因染色体1q21-p13的缺陷导致的。显性模式似乎与第6号染色体上的变化相关，但一些研究还报导了在第12号染色体上的定位。

负责隐性Stargardt病的基因已被鉴定为ABCA4基因(Allikmets，R.，等人1997.A photoreceptor cell-specific ATP-binding transporter gene(ABCR)is mutated in recessive Stargardt macular dystrophy.Nat Genet 15：236-246)，该基因编码ABCR蛋白——ATP-结合盒(ABC)转运蛋白家族的成员。其在感光器中表达并且已被定位在外节盘缘。

与ABCA4中的突变相关的其他疾病包括视锥视杆营养不良(cone-rod distrophy)(Maugeri，A.，等人，2000，“Mutations in the ABCA4(ABCR)gene are the major cause of autosomal recessive cone-rod dystrophy”Am JHum Genet 67：960-966.)和色素性视网膜炎(Cremers，F.P.，等人1998.“Autosomal recessive retinitis pigmentosa and cone-rod dystrophy caused by splice site mutations in the Stargardt′s disease gene ABCR”Hum Mol Genet 7：355-362；Martinez-Mir，等人1998.“Retinitis pigmentosa caused by a homozygous mutation in the Stargardt disease gene ABCR”Nat Genet18：11-12)。重要地，人中杂合ABCA4突变(Allikmets，R.等人1997“Mutation of the Stargardt disease gene(ABCR)in age-related macular degeneration”Science 277：1805-1807)已经与年龄相关性黄斑变性(AMD)(老年人中最常见的致盲疾病)相关(Seddon，J.M.2001.Epidemiology of Age-Related Macular Degeneration.St Louis，Missouri，USA：Schachat，A.P.1039-1050pp)。

发明描述

本发明基于如下发现：具有AAV5壳体的编码ABCA4的腺相关病毒载体的施用(优选眼内施用)导致该蛋白质定位在视杆外段和Abca4-/-视网膜的显著并且稳定的形态学和功能性改善。特别地，已发现在STGD动物模型中，rAAV2/5-CMV-Abca4的视网膜下给药导致脂褐素(lipofuscin)水平、RPE异常和视网膜功能的显著矫正。