[发明专利]病毒浓缩方法

权利要求书

1.一种浓缩病毒的方法，该方法包括以下步骤：

(1)通过使凝集素与含病毒液接触、并使病毒与凝集素结合，并且，

(i)该凝集素与能够与载体结合的分子相连接，并通过该分子结合于载体，从而与凝集素结合的病毒间接地结合于载体，或者

(ii)该凝集素直接结合于载体，从而使与凝集素结合的病毒结合于载体；

(2)从含病毒液分离载体；

(3)用含糖的洗脱液处理回收的载体，并从该载体洗脱病毒，其中，该洗脱液的量少于(1)的含病毒液的容积；以及

(4)从(3)的洗脱液分离载体，从而得到病毒浓缩液。

2.一种浓缩病毒的方法，该方法包括以下步骤：

(1)在含病毒液中混合生物素化凝集素，并使病毒与生物素化凝集素接触，进一步添加结合有生物素结合蛋白质的载体，使与生物素化凝集素结合的病毒结合于载体；

(2)从含病毒液分离载体；

(3)用含糖的洗脱液处理回收的载体，从该载体洗脱病毒，其中，该洗脱液的量少于(1)的含病毒液的容积；以及

(4)从(3)的洗脱液分离载体，从而得到病毒浓缩液。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述病毒是具有包膜的病毒或从具有包膜的病毒来源的病毒。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述病毒是慢病毒或疱疹病毒。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述凝集素是与包含N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)、α2-6键的唾液酸(Siaα2-6)、N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)中的至少一种的糖结合的凝集素。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述凝集素选自SBA(大豆来源)、SSA(无梗接骨木来源)、DSA(白曼陀罗来源)和WGA(小麦胚芽来源)。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述凝集素是WGA(小麦胚芽来源)，用于病毒的洗脱的糖是壳寡糖；或者，所述凝集素是SBA(大豆来源)，用于病毒的洗脱的糖是N-乙酰基-D-半乳糖胺或含N-乙酰基-D-半乳糖胺的糖。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述病毒是慢病毒，所述凝集素是WGA(小麦胚芽来源)，用于病毒的洗脱的糖是壳寡糖；或者，所述病毒是慢病毒，所述凝集素是SBA(大豆来源)，用于病毒的洗脱的糖是N-乙酰基-D-半乳糖胺或含N-乙酰基-D-半乳糖胺的糖。

9.一种浓缩病毒的方法，该方法包括以下步骤：

(1)使直接结合于直径10nm～100nm的纳米珠的凝集素与含病毒液接触，并使病毒结合于纳米珠；

(2)从含病毒液分离纳米珠；

(3)用含糖的洗脱液处理回收的纳米珠，并从该纳米珠洗脱病毒，其中，该洗脱液的量少于(1)的含病毒液的容积；以及

(4)从(3)的洗脱液分离纳米珠，从而得到病毒浓缩液。

10.一种用于通过权利要求2所述的方法浓缩病毒的试剂盒，该试剂盒包含生物素化凝集素、生物素结合蛋白质珠和用于从载体洗脱病毒的糖。

11.一种用于通过权利要求2所述的方法浓缩病毒的试剂盒，该试剂盒包含：

(a)生物素化WGA、生物素结合蛋白质和壳寡糖；或

(b)生物素化SBA、生物素结合蛋白质和N-乙酰基-D-半乳糖胺或含N-乙酰基-D-半乳糖胺的糖。