[发明专利]用于在化学成分确定的培养基中培养细胞的合成表面

权利要求书

1.一种培养分离的未分化干细胞群体的方法，包括：

提供细胞培养制品，该制品具有基材、设置在该基材上的合成聚合物层和偶联于该合成聚合物层的肽，

其中该肽包含RGD的氨基酸序列；

在偶联于该细胞培养制品的合成聚合物层的多肽上用化学成分确定的细胞培养基培养未分化的干细胞；

维持培养该细胞至少5代。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述合成聚合物层是设置在基材表面上的可溶胀(甲基)丙烯酸酯层，其中所述可溶胀(甲基)丙烯酸酯层由包含含羧基的(甲基)丙烯酸酯单体、交联(甲基)丙烯酸酯单体和能与该含羧基的(甲基)丙烯酸酯单体及交联(甲基)丙烯酸酯单体聚合的亲水性单体的组合物形成。

3.如权利要求2所述的细胞培养制品，其特征在于，所述含羧基的(甲基)丙烯酸酯单体是丙烯酸2-羧基乙酯。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述交联(甲基)丙烯酸酯单体是二甲基丙烯酸四(甘醇)酯或二丙烯酸四(甘醇)酯。

5.如权利要求2所述的细胞培养制品，其特征在于，所述亲水性单体选自下组：甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸羟丙酯、丙烯酸2-羟乙酯、1-乙烯基-2-吡咯烷酮、二(乙二醇)乙醚甲基丙烯酸酯、丙烯酰胺、乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯或3-磺基丙基二甲基-3-甲基丙烯酰胺基丙基-铵。

6.如权利要求2所述的细胞培养制品，其特征在于，所述交联(甲基)丙烯酸酯单体与所述含羧基甲基(丙烯酸酯)单体与所述亲水性单体的体积比是约3∶20∶80。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞传代10次或更多次。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述化学成分确定的培养基包含碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β1。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干细胞是未分化的人干细胞。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述干细胞是人胚胎干细胞。

11.一种细胞培养制品，其包括：

具有表面的基材；

设置在该基材表面上的可溶胀(甲基)丙烯酸酯层，其中所述可溶胀(甲基)丙烯酸酯层可由包含含羧基的(甲基)丙烯酸酯单体、交联(甲基)丙烯酸酯单体和能与含羧基的(甲基)丙烯酸酯单体及交联(甲基)丙烯酸酯单体聚合的亲水性单体的组合物形成；和

偶联于该可溶胀(甲基)丙烯酸酯层的含羧基单体的羧基的肽。

12.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述可溶胀(甲基)丙烯酸酯层在水中的平衡水含量为约5％-约50％。

13.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述可溶胀(甲基)丙烯酸酯层在水中的平衡水含量为约10％-约40％。

14.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述含羧基的(甲基)丙烯酸酯单体是丙烯酸2-羧基乙酯。

15.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述交联(甲基)丙烯酸酯单体是二甲基丙烯酸四(甘醇)酯或二丙烯酸四(甘醇)酯。

16.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述亲水性单体选自下组：甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸羟丙酯、丙烯酸2-羟乙酯、1-乙烯基-2-吡咯烷酮、二(乙二醇)乙醚甲基丙烯酸酯、丙烯酰胺、乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯或3-磺基丙基二甲基-3-甲基丙烯酰胺基丙基-铵。

17.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述交联(甲基)丙烯酸酯单体与所述含羧基甲基(丙烯酸酯)单体与所述亲水性单体的体积比是约1-10∶约10-40∶约60-90。

18.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述交联(甲基)丙烯酸酯单体与所述含羧基甲基(丙烯酸酯)单体与所述亲水性单体的体积比是约3∶20∶80。

19.如权利要求11所述的细胞培养制品，其特征在于，所述可溶胀(甲基)丙烯酸酯层不含多肽交联剂。