[发明专利]β-淀粉酶、编码其的基因和其制造方法有效

专利信息
申请号: 200980116459.5 申请日: 2009-04-21
公开(公告)号: CN102016033A 公开(公告)日: 2011-04-13
发明(设计)人: 松永亚希子;天野仁;山口庄太郎 申请(专利权)人: 天野酶株式会社
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/26;C12P19/12;C12P19/22
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 苗堃;金世煜
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 淀粉酶 编码 基因 制造 方法
【权利要求书】:

1.弯曲芽孢杆菌来源的β-淀粉酶。

2.具有下述酶化学性质的β-淀粉酶:

(1)作用:作用于多糖类和寡糖类的α-1,4糖苷键,将麦芽糖游离;

(2)底物特异性:良好地作用于淀粉、直链淀粉、支链淀粉、糖原、麦芽四糖、麦芽戊糖、麦芽己糖、麦芽庚糖,而不作用于普鲁兰多糖、葡聚糖、环糊精、麦芽三糖;

(3)最适温度:约55℃;

(4)最适pH:约8.0;

(5)温度稳定性:在55℃以下稳定(pH 5.0、10分钟);

(6)pH稳定性:在pH 4~9稳定(30℃、3小时);

(7)分子量:约60000(SDS-PAGE)。

3.具有序列号7中所示的氨基酸序列、或与该氨基酸序列等价的氨基酸序列的β-淀粉酶。

4.根据权利要求3所述的β-淀粉酶,所述等价的氨基酸序列是与序列号7中所示的氨基酸序列90%以上相同的氨基酸序列。

5.以权利要求1~4中任一项所述的β-淀粉酶作为有效成分的酶剂。

6.由选自以下(A)~(C)中任一项的DNA构成的β-淀粉酶基因:

(A)编码序列号7中所示的氨基酸序列的DNA;

(B)由序列号6中所示的碱基序列构成的DNA;

(C)具有与序列号6中所示的碱基序列等价的碱基序列,且编码具有β-淀粉酶活性的蛋白质的DNA。

7.含有权利要求6所述的β-淀粉酶基因的重组载体。

8.导入有权利要求6所述的β-淀粉酶基因的转化体。

9.β-淀粉酶的制造方法,其包括以下步骤(1)和(2)、或步骤(i)和(ii):

(1)培养具有β-淀粉酶产生能力的弯曲芽孢杆菌的步骤,

(2)从培养后的培养液和/或菌体回收β-淀粉酶的步骤;

(i)在产生所述基因编码的蛋白质的条件下培养权利要求8所述的转化体的步骤,

(ii)回收产生的所述蛋白质的步骤。

10.根据权利要求9所述的制造方法,所述弯曲芽孢杆菌是保藏编号为NITE BP-548的特定菌株。

11.保藏编号为NITE BP-548的特定弯曲芽孢杆菌株。

12.麦芽糖的生成方法,其特征在于,使弯曲芽孢杆菌来源的β-淀粉酶作用于以葡萄糖的α-1,4键作为主链的多糖或寡糖。

13.根据权利要求12所述的生成方法,所述β-淀粉酶是权利要求2~4中任一项所述的β-淀粉酶。

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