[发明专利]β-淀粉酶、编码其的基因和其制造方法

权利要求书

1.弯曲芽孢杆菌来源的β-淀粉酶。

2.具有下述酶化学性质的β-淀粉酶：

(1)作用：作用于多糖类和寡糖类的α-1，4糖苷键，将麦芽糖游离；

(2)底物特异性：良好地作用于淀粉、直链淀粉、支链淀粉、糖原、麦芽四糖、麦芽戊糖、麦芽己糖、麦芽庚糖，而不作用于普鲁兰多糖、葡聚糖、环糊精、麦芽三糖；

(3)最适温度：约55℃；

(4)最适pH：约8.0；

(5)温度稳定性：在55℃以下稳定(pH 5.0、10分钟)；

(6)pH稳定性：在pH 4～9稳定(30℃、3小时)；

(7)分子量：约60000(SDS-PAGE)。

3.具有序列号7中所示的氨基酸序列、或与该氨基酸序列等价的氨基酸序列的β-淀粉酶。

4.根据权利要求3所述的β-淀粉酶，所述等价的氨基酸序列是与序列号7中所示的氨基酸序列90％以上相同的氨基酸序列。

5.以权利要求1～4中任一项所述的β-淀粉酶作为有效成分的酶剂。

6.由选自以下(A)～(C)中任一项的DNA构成的β-淀粉酶基因：

(A)编码序列号7中所示的氨基酸序列的DNA；

(B)由序列号6中所示的碱基序列构成的DNA；

(C)具有与序列号6中所示的碱基序列等价的碱基序列，且编码具有β-淀粉酶活性的蛋白质的DNA。

7.含有权利要求6所述的β-淀粉酶基因的重组载体。

8.导入有权利要求6所述的β-淀粉酶基因的转化体。

9.β-淀粉酶的制造方法，其包括以下步骤(1)和(2)、或步骤(i)和(ii)：

(1)培养具有β-淀粉酶产生能力的弯曲芽孢杆菌的步骤，

(2)从培养后的培养液和/或菌体回收β-淀粉酶的步骤；

(i)在产生所述基因编码的蛋白质的条件下培养权利要求8所述的转化体的步骤，

(ii)回收产生的所述蛋白质的步骤。

10.根据权利要求9所述的制造方法，所述弯曲芽孢杆菌是保藏编号为NITE BP-548的特定菌株。

11.保藏编号为NITE BP-548的特定弯曲芽孢杆菌株。

12.麦芽糖的生成方法，其特征在于，使弯曲芽孢杆菌来源的β-淀粉酶作用于以葡萄糖的α-1，4键作为主链的多糖或寡糖。

13.根据权利要求12所述的生成方法，所述β-淀粉酶是权利要求2～4中任一项所述的β-淀粉酶。