[发明专利]使灵长类多能干细胞分化成为造血谱系细胞

说明书

本发明提供使灵长类多能干细胞分化成为造血谱系细胞的方法。本发明还提供灵长类多能干细胞分化产生的造血谱系细胞以及利用这些细胞的方法和包含这些细胞的试剂盒。

本申请要求2008年3月27日提交的临时申请号61/039,835和2008年7月16日提交的临时申请号61/081,242的优先权，二者通过引用全文纳入本文。

发明领域

本发明涉及干细胞生物学领域。

背景

多能干细胞能在培养中连续增殖并在合适的培养条件下分化成为所有三种原胚层：内胚层、中胚层和外胚层的代表性谱系限制性细胞类型(美国专利号5,843,780；6,200,806；7,029,913；Shamblott等.，(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95：13726；Takahashi等.，(2007)Cell 131(5)：861；Yu等.，(2007)Science318：5858)。为特定谱系限制性类型细胞明确适当的生长条件将能实际上提供无限的细胞类型以供研究和治疗应用。

能使多能干细胞分化成为造血谱系细胞将特别有用。造血谱系细胞由中胚层发育产生，包括白细胞和红细胞，二者分别构成免疫和循环系统。无限提供这些细胞将为更完全地了解免疫系统和循环系统的发育和功能提供必需的工具。也能了解调节有益和有害免疫应答的策略。

免疫系统可提供先天或非特异性免疫应答，以及适应性或特异性免疫应答。适应性免疫应答是持久的保护性应答，大多数疫苗方案试图刺激的正是这种应答。参与适应性免疫应答的细胞包括淋巴细胞(T细胞和B细胞)以及树突状细胞(DC)。T细胞和B细胞通过特异性识别病原体上表达的抗原表位而消除靶病原体。T细胞具有专门适合靶向病毒感染细胞和肿瘤细胞的细胞毒性能。B细胞分泌的抗体能结合靶抗原并激活补体系统促进对靶标的裂解和调理作用。两种应答的特征均是记忆应答，因此有长期保护作用。DC在启动适应性免疫应答中起着至关重要的作用。它们将与主要组织相容性复合物(MHC)结合的抗原呈递给淋巴细胞，因此提供了产生适应性免疫应答的初始刺激。DC的这种迅捷提供可能是使宿主产生治疗性或预防性免疫应答的方式。

许多研究证明DC可能是产生适应性免疫应答的载体(参见，例如Mayordomo等.，(1995)Nature Med 1：1297；Celluzi等.，(1996)J.Exp.Med.183：283；Su等.，(1998)J.Exp.Med.188：809)，包括研究了用放射线照射DC的作用(参见，例如Cao等.(2004)CellBiology International 28：223；Merrick等.，(2005)British Journal Of Cancer 92：1450；Young等.(1993)Blood 81(11)：2987；Denfield等.(2001)Journal Of LeukocyteBiology 69：548；Dudda等.(2004)Journal of Investigative Dermatology 122：945)。