[发明专利]用于抑制志贺毒素和志贺样毒素的组合物和方法

说明书

相关申请的引用

这件非临时申请要求2008年5月9日递交的美国临时申请第61/051,874号的优先权，该申请的全部内容通过引证在此全部并入本文。

发明领域

本发明主要涉及用于治疗或者预防能够产生志贺毒素(Shigatoxin)和志贺样毒素(Shiga-like toxin)的细菌造成的感染的组合物和方法，尤其涉及包括融合多肽的组合物，所述融合多肽包括能够抑制志贺毒素(Shiga toxin)和志贺样毒素(Shiga-liketoxin)的碳水化物抗原决定簇。

背景技术

志贺毒素(Shiga toxin)和志贺样毒素(Shiga-like toxin)由毒素A亚单位和5个结合碳水化物的B亚单位组成。志贺毒素(Shiga toxin)由痢疾志贺菌产生。该毒素与表达Gb3(Galα4Galβ4GlcβlCer)的细胞结合，并且通过内化作用抑制蛋白合成，导致被感染的个体患上腹泻，出血性肠炎或溶血性尿毒症综合症。已经显示，由于痢疾志贺菌感染诱导产生的细胞因子能够在一些细胞中产生Gb3。志贺样毒素(Shiga-like toxin)1与志贺毒素非常相似，也能够识别Gb3。志贺样毒素(Shiga-liketoxin)2可以以多种不同的形式存在，大多数志贺样毒素(Shiga-like toxin)2还能够识别Gb3，但是只有一个形式的志贺样毒素(Shiga-like toxin)2也能够结合Gb4(GalNAcβ3Galα4Galβ4GlcβlCer)。研究表明，碳水化物配体的脂质部分对识别作用至关重要。志贺样毒素(Shiga-like toxin)1和志贺样毒素(Shiga-like toxin)2主要通过肠出血性大肠杆菌(EHEC)生产，同时可以通过豚鼠气单胞菌、嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌和阴沟肠杆菌生产。虽然志贺毒素(Shiga toxin)和志贺样毒素存在相似性，但是在细胞功能和对宿主免疫系统的相互作用方面也存在一些差异。

发明内容

本发明部分地基于一种发现，即碳水化物抗原决定簇可以在粘蛋白型蛋白骨架的不同核心糖链上高密度特异性表达，所述碳水化物抗原决定簇能够调节(即，妨碍、抑制)志贺毒素和志贺样毒素与宿主细胞表面的结合。这里涉及的多肽是志贺毒素抑制素(STI)融合蛋白或者SI多肽。重组地、具有大量糖基化地蛋白质携带有丰富的O-连接的聚糖，该聚糖被碳水化物决定簇封端，所述蛋白质具有已知的细菌毒素结合活性，可以作为诱饵，因此特定的预防(例如，空间抑制)细菌毒素在例如呼吸道或者肠胃道的感染。所述融合蛋白具有低毒性，并且具有低的产生细菌抗药性的风险。

在一个方面，本发明提供了一种融合多肽，该融合多肽包括一种第一多肽，第一多肽携带有Galα4Galβ3GalNAcα和/或Galα4Galβ4GlcNac碳水化物抗原决定簇，可操作的与一种第二多肽相连。所述第一多肽对这些抗原决定簇是多价的。第一多肽是例如，一种粘蛋白多肽，例如PSGL-I或者其一部分。优选的，所述粘蛋白多肽是PSGL-I的细胞外部分。

所述第二多肽至少包括一种免疫球蛋白多肽区域。例如，第二多肽包括免疫球蛋白重链多肽区域。做为选择，所述多肽包括免疫球蛋白重链的Fc区域。

所述融合多肽是一种多聚体，优选的，所述融合多肽是一种二聚体。

本发明还包括一种核酸，这种核酸编码SI融合多肽。本发明还包括一种载体和一种细胞，这种载体包括这里描述的编码SI融合多肽的核酸，所述细胞包括上述载体或者这里描述的细胞。选择性的，所述载体进一步包括编码一种或者一种以上糖基转移酶的核酸，所述糖基转移酶是合成所需碳水化物抗原决定簇所必须的。例如，所述载体包括编码αl，4-半乳糖基转移酶的核酸，并任选的包括编码核心2β1，6-N-乙酰氨基葡萄糖甘露糖转移酶的核酸。