[发明专利]利用红细胞内含有的血红蛋白的本征色素沉着来确定血样的红细胞指数的方法及设备

权利要求书

1.一种用于确定血液样本内的红细胞血红蛋白浓度的方法，包括以下步骤：

将样本滴落在适于静止保持样本以进行分析的分析腔室中，所述腔室由第一平板的内表面和第二平板的内表面限定，其中两个平板都是透明的，并且所述腔室具有在两个平板的内表面之间延伸的已知高度或者可确定的高度，该高度使得样本内的至少一个红细胞与两个内表面都接触；

对与两个内表面都接触的所述至少一个红细胞成像；

确定被成像的红细胞上与两个内表面接触的至少一部分的光密度；以及

使用所确定的光密度来确定与内表面接触的红细胞的血红蛋白浓度。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述光密度是基于每个图像单位来确定的。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述图像单位是像素。

4.如权利要求1所述的方法，进一步包括以下步骤：

确定与内表面接触的多个红细胞的血红蛋白浓度；以及

使用为所述多个红细胞中的每一个红细胞确定的血红蛋白浓度来确定平均血红蛋白浓度。

5.如权利要求4所述的方法，其中对整个样本成像。

6.如权利要求1所述的方法，进一步包括在至少一部分样本中掺合等容球状试剂的步骤。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述等容球状试剂是两性离子去污剂。

8.如权利要求7所述的方法，其中两个平板的内表面实质上是平行的，并且在确定血红蛋白浓度之前已知腔室高度。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述腔室高度处在大约2微米到6微米之间的范围内。

10.如权利要求1所述的方法，进一步包括以下步骤：

对多个红细胞成像，每个这种红细胞的至少一部分与内表面接触；

确定每个这种红细胞上与两个内表面接触的这部分的光密度；

使用为所述多个红细胞中的至少一些确定的光密度来确定平均最大光密度；以及

使用所确定的平均最大光密度，来确定样本内不与两个内表面都接触的一个或多个红细胞的血红蛋白浓度。

11.如权利要求1所述的方法，其中所述样本具有掺合有等容球状试剂的第一部分和没有掺合等容球状试剂的第二部分。

12.如权利要求11所述的方法，其中不与两个内表面都接触的一个或多个红细胞中的至少一些存在于样本的第二部分内，并且该方法进一步包括确定处于第二部分内的不与两个内表面都接触的一些红细胞的未改变的形态的步骤。

13.如权利要求1所述的方法，进一步包括在样本中掺合体外活体染料的步骤，该染料用于使样本内的网状细胞内的网状蛋白在被一个或多个预定波长的光激发时发出荧光。

14.如权利要求13所述的方法，进一步包括利用荧光面积或者荧光强度来确定一个或多个发出荧光的网状细胞内的网状蛋白的相对量的步骤。

15.如权利要求13所述的方法，进一步包括以下步骤：

对多个红细胞进行成像，每个这种红细胞的至少一部分与内表面接触，其中使用至少一个或多个预定波长的光执行该成像，所述至少一个或多个预定波长的光被红细胞内的血红蛋白吸收；

以用于使得网状细胞内的网状蛋白发出荧光的预定波长对所述多个红细胞进行成像；

确定每个这种红细胞上与两个内表面接触的部分的光密度；

使用所确定的光密度值，来确定所述多个红细胞中除了发出荧光的那些红细胞之外的每个红细胞的血红蛋白浓度；以及

使用为所述多个红细胞中除了发出荧光的那些红细胞之外的每个红细胞所确定的血红蛋白浓度，来确定平均血红蛋白浓度。

16.如权利要求1所述的方法，其中在一个或多个预定波长下执行成像步骤，并且血红蛋白浓度的确定利用了针对所述一个或多个预定波长的血红蛋白的摩尔消光系数。

17.如权利要求16所述的方法，其中使用分析设备执行成像步骤，该分析设备被校准以确定针对该分析设备的经过校准的血红蛋白摩尔消光系数值。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述血液样本实质上是未稀释的。

19.如权利要求1所述的方法，其中所述血液样本是全血。