[发明专利]用于测量细胞增殖的双标记法

权利要求书

1.用于测量细胞核酸合成的变化的方法：

a)将样品与有效量的第一核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第一温育样品；

b)将第一温育样品与至少一种第二核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第二温育样品；

c)将第二温育样品与第一标记试剂和至少一种第二标记试剂一起温育以形成标记的样品；

d)检测标记的样品，其中测量所述第一和至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平，

其中将所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平相对于所述第一核苷或核苷酸类似物的掺入水平的差异测量为细胞核酸合成的变化，

前提是所述第一核苷或核苷酸或所述至少一种第二核苷或核苷酸包含生物正交功能部分。

2.用于测量细胞DNA合成的变化的方法：

a)将样品与有效量的第一核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第一温育样品；

b)将第一温育样品与至少一种第二核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第二温育样品；

c)将第二温育样品与第一标记试剂和至少一种第二标记试剂一起温育以形成标记的样品；

d)检测标记的样品，其中测量第一和至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平，

其中将所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平相对于所述第一核苷或核苷酸类似物的掺入水平的差异测量为细胞DNA合成的变化，

前提是所述第一核苷或核苷酸或所述至少一种第二核苷或核苷酸包含生物正交功能部分。

3.用于测量细胞RNA合成的变化的方法：

a)将样品与有效量的第一核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第一温育样品；

b)将第一温育样品与至少一种第二核苷或核苷酸类似物一起温育以形成第二温育样品；

c)将第二温育样品与第一标记试剂和至少一种第二标记试剂一起温育以形成标记的样品；

d)检测标记的样品，其中测量第一和至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平，

其中将所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物的掺入水平相对于所述第一核苷或核苷酸类似物的掺入水平的差异测量为细胞RNA合成的变化，

前提是所述第一核苷或核苷酸或所述至少一种第二核苷或核苷酸包含生物正交功能部分。

4.权利要求1的方法，其中在用所述至少一种第二核苷或核苷酸类似物进行处理的同时或在此之前，用受试化合物处理样品。

5.权利要求1的方法，其中所述第一类似物包含生物正交功能部分。

6.权利要求1的方法，其中所述至少一种第二类似物包含生物正交功能部分。

7.权利要求1的方法，其中所述第一类似物或所述至少一种第二类似物包含卤素部分。

8.权利要求1的方法，其中所述生物正交功能部分可经历[3+2]环加成反应。

9.权利要求1的方法，其中所述生物正交功能部分可经历Staudinger连接反应。

10.权利要求1的方法，其中所述生物正交功能部分包含叠氮基、炔烃或膦部分。

11.权利要求1的方法，其中第一和第二类似物的至少一种，但非全部，是乙炔基-脱氧尿嘧啶(EdU)。

12.权利要求1的方法，其中第一和第二类似物的至少一种，但非全部，是5-叠氮基-2′-脱氧尿嘧啶(AzdU)。

13.权利要求7的方法，其中卤素部分是溴、氯或碘。

14.权利要求1的方法，其中第一和第二类似物的至少一种，但非全部，是BrdU。

15.权利要求1的方法，其中所述第一标记试剂和第二标记试剂是包含生物正交功能部分的标记物或抗体。

16.权利要求15的方法，其中所述生物正交功能部分可经历[3+2]环加成反应。

17.权利要求15的方法，其中所述生物正交功能部分可经历Staudinger连接反应。

18.权利要求15的方法，其中所述生物正交功能部分是叠氮基、炔烃或膦部分。

19.权利要求15的方法，其中所述标记物是荧光染料。

20.权利要求15的方法，其中所述抗体是抗BrdU抗体。