[发明专利]能与复数个甲型流感病毒亚型反应的单克隆抗体

说明书

技术领域

本发明总体上属于免疫学领域。更具体地，本发明涉及针对甲型流感病毒的HA (血凝素)抗原的单克隆抗体。

发明背景

在世界范围内每年的流感病毒流行病代表着发病和死亡的一个重要原因。在美国，据估计每年超过200,000人因为与流感病毒有关的综合征而住院，其中约40,000例死亡或多或少地与之直接有关(Thompson 等人, JAMA, 2003, 289:179-186)。除了这些数字以外，我们还必须考虑下述情况，即成指数增加的更多数量的受感染的患者待在家中或长或短的时间段，由于工作日的减少导致不可避免的经济损失。一项近期的工作(Molinari 等人, Vaccine, 2007, 25: 5086-5096)已经估计，与每年的流行病直接有关的医疗成本是每年104亿美元，由于不能工作造成收入减少，必须再增加163亿美元。如果在计算中也考虑其它项目，例如与受感染的患者的死亡有关的经济损失的货币化，该总额升高至难以置信的871亿美元的数字。这些与每年流行病有关的经济数据，以及由于人类新流感病毒的出现在不远的将来的任意时刻可能发生的可怕大流行病，解释了搜寻有效的策略来控制这些病毒的传播的重大意义。

目前，以某种方式对抗每年流感流行病的唯一可利用的工具是含有病毒的分离抗原的灭活三价疫苗，所述抗原被假定为下一个流感季的流行病的成因。基于与一些监测的地理区域的早期分离有关的流行病学数据，这类预测不总是被证实是正确的。因而，年复一年总是存在一项根本不可忽视的任务，即为特定流感季开发的三价疫苗可能被证实基本上是无效的。

在该情况下，以及在新的大流行病的情况下，唯一可利用的预防/治疗手段将是求助于两类可利用的抗病毒药物：M2蛋白抑制剂(金刚烷胺和金刚乙胺)和神经氨酸酶抑制剂 (奥塞米韦和扎那米韦)。但是，在这样的情形下，也已经预见到一系列问题，其不仅与需要在感染的非常早期施用抗病毒药有关，而且与抗性病毒分离物的快速出现（但是这已经发生）有关。

一种替代性的有效策略是基于中和抗体制品，其针对关键的病毒蛋白，且能识别不同的流感病毒分离物之间共有的这类蛋白。

为了更好地理解基于抗体的被动给药的方案的潜力，有用地简单地提及流感病毒的主要结构特征。流感病毒属于正粘病毒科家族，其特征是存在源自受感染的细胞膜的被膜，在这上面存在约500个刺突，也称作突出物。这样的突出物由来自两种重要的病毒表面蛋白血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的三聚体和四聚体组成。完整的膜蛋白(M2)也存在于被膜表面上，该蛋白以比血凝素和神经氨酸酶低得多的数量存在，且也组织成四聚体。

流感病毒的其它特征是，在核心中存在分段的基因组，其包含8个单链RNA片段。基于病毒体内的一些蛋白(NP和M1)的特征，可识别出3种流感病毒类型: 甲型, 乙型,和丙型。

甲型和乙型病毒会引起每年的流行病。相反，丙型病毒会引起严重性更低的综合征。

在甲型病毒(引起大流行病且甚至能在每年流行病中造成最严重的综合征的唯一原因)中，基于血凝素和神经氨酸酶的抗原特征，还可识别出不同的亚型。在近期的历史进程中已经侵袭人类的亚型是H1N1和H3N2亚型(目前仍然在循环，且包含在疫苗制品中)以及H2N2亚型（从1968以来不再循环，且造成1957年的所谓“亚洲”流感）。其它亚型已经偶发地侵袭人类(H9N2, H7N7，和令人恐惧的近期的H5N1亚型)，但是它们尚未成功地有效传播和替代循环亚型。

表面蛋白的作用在病毒复制周期中是必需的。更具体地，血凝素是使病毒识别在某些细胞的表面上存在的唾液酸并感染它们的蛋白。相反，神经氨酸酶在病毒复制周期的末端（也就是新病毒颗粒从受感染的细胞释放的过程中）起作用。它的功能是，辅助新形成的病毒体的血凝素从生成它们的细胞的表面上存在的唾液酸释放出来。这两种蛋白所起的关键作用，以及它们在病毒表面上的展示，解释了它们代表免疫应答的主要靶物的原因，和它们易于高突变率的原因。实际上，每年的流行病的成因病毒或多或少地不同于前些年的成因病毒，因此能有效性或高或低地逃过它们刺激的免疫应答。换而言之，血凝素(主要地)和神经氨酸酶(次要地)中的点突变的逐渐累积，使得在以前的流行病过程中生成的保护性抗体总体上逐渐失效。