[发明专利]肽及其衍生物、其制备及其在制备治疗性和/或预防性的活性药物组合物中的用途

说明书

本发明涉及肽及其衍生物、其制备及其在制备治疗性和/或预防性的活性药物中的用途、以及这样的药学药物。

EP1586586描述了具有抗炎效应的来自纤维蛋白序列的肽的用途。

所述效应可以基于以下事实：纤维蛋白和在纤维蛋白分解过程中产生的纤维蛋白片段通过Bβ-链的新的N末端与内皮细胞结合，并且通过Aα-链的序列与血流中的细胞结合，从而导致这些细胞向组织中的粘附和迁移。纤维蛋白和纤维蛋白片段与内皮细胞的结合伴侣是蛋白“血管内皮(VE)钙粘蛋白”，其在邻近的内皮细胞之间的粘合连接(adherens junction)专有地表达。根据本发明的肽阻断该相互作用，从而抵制血细胞的迁移。但是，血液中的白细胞抵抗感染的天然防御并不受到有害影响。因此，其成分，例如粒细胞、淋巴细胞和单核细胞，保持不受影响，从而天然防御过程仍然维持。

纤维蛋白原在肝脏中产生，这种形式的纤维蛋白原是无生物学活性的，在血液中其浓度通常是约3g/l。酶原凝血酶原的蛋白水解切割引起凝血酶的形成，凝血酶将纤维蛋白肽A和B从纤维蛋白原上切割下来。通过这种方式，纤维蛋白原被转化为其生物学活性形式。产生了纤维蛋白和纤维蛋白切割产物。

每当血液凝固被激活时，即由于组织损伤、炎症、外伤或发生退化，凝血酶即形成。凝血酶介导的纤维蛋白的形成本质上是保护性过程，其旨在使血管系统造成的任何破损迅速封闭。但是，纤维蛋白的形成也是病理过程。纤维蛋白血栓的出现(其为心脏梗塞的激发起因)是人类医药中的最突出的问题之一。

一方面，纤维蛋白在炎性细胞脱离血流进入组织的过程中发挥的作用是抵御组织中的致病微生物或肿瘤细胞的想要的过程，但另一方面，其自身是诱导或延长对组织造成的损伤的过程，目前尚未对其进行任何检查或进行了足够程度的检查。纤维蛋白通过Bβ的序列经由Bβ的新的N末端与内皮细胞结合，并且通过Aα的序列与血流中的细胞结合，从而导致细胞向组织中的粘附和迁移。

通过以上描述的机理，根据本发明的肽或蛋白可以阻止细胞从血流向血管壁的内皮细胞的粘附和/或它们随后从血液向组织的迁移。

与急性炎性疾病相关的主要异常之一是内皮屏障功能的丧失。内皮的结构和功能上的完整性对于维持屏障功能是必需的，如果其中任一项被破坏，溶解物和多余的血浆液体将穿过单层泄漏，导致组织水肿和炎性细胞的迁移。很多试剂通过激发内皮细胞形状的改变(例如收缩或缩回)而增加单层的通透性，导致细胞间间隙的形成(Lum & Malik，Am.J.Physiol.267：L223-L241，1994)。这些试剂包括例如凝血酶、缓激肽和血管内皮生长因子(VEGF)。

血管壁的高通透性允许多余的液体的泄漏并允许蛋白进入间隙空间。这种急性炎性事件经常伴随着组织缺血和急性器官功能失常。由于在邻近的EC之间形成大的细胞旁洞(paracellular hole)，所以在激活的内皮细胞(EC)的位点形成的凝血酶启动该微血管屏障功能失常(Carbajal等人，Am J Physiol Cell Physiol 279：C195-C204，2000)。这个过程的特征在于由于肌球蛋白轻链磷酸化(MLCP)(其启动F-肌动蛋白依赖性的细胞骨架收缩紧张的产生)造成的EC形状的改变(Garcia等人，J Cell Physiol.1995；163：510-522 Lum & Malik，Am J Physiol Heart Circ Physiol.273(5)：H2442-H2451.1997)。

凝血酶诱导的内皮高通透性还可以由细胞-细胞粘附的变化所介导(Dejana J.Clin.Invest.98：1949-1953，1996)。内皮细胞-细胞粘附主要由血管内皮(VE)钙粘蛋白(钙粘蛋白5)的功能决定，所述蛋白是形成粘合连接的钙依赖性的细胞-细胞粘附分子。通过与辅助蛋白b-连接素、盘状球蛋白(g-连接素)和p120(这些蛋白继而与a-连接素(与粘着斑蛋白同源)连接)以及F-肌动蛋白细胞骨架的结合而从细胞质一侧调节钙粘蛋白5的功能。