[发明专利]基于慢病毒的免疫原性载体

权利要求书

1.一种慢病毒载体，包括

5′长末端重复序列(LTR)和3′LTR；

可操作地连接到所述5′LTR的第一核酸序列；

可操作地连接到所述5′LTR的第二核酸序列，包括功能REV编码序列和含有rev反应元件(RRE)的序列，其中所述含有RRE的序列位于所述REV编码序列的上游；并且

其中所述第一核酸序列和所述第二核酸序列的转录被所述5′LTR驱动。

2.权利要求1所述的载体，进一步包括编码一个或多个功能上有活性的慢病毒RNA包装元件的核酸序列。

3.权利要求1所述的载体，进一步包括编码功能性中央多聚嘌呤区(cPPT)和中央终止序列(cTS)和3′LTR近端多聚嘌呤区(PPT)元件的核酸序列。

4.权利要求1所述的载体，其中所述第一核酸序列编码一个或多个感兴趣的抗原序列。

5.权利要求4所述的载体，其中所述一个或多个感兴趣的抗原序列的表达依赖REV-RRE活性。

6.权利要求1所述的载体，其中所述第一核酸序列包括Gag/Pol编码序列或其衍生物。

7.权利要求6所述的载体，其中所述第一核酸序列是未修饰的序列。

8.权利要求6所述的载体，其中所述Gag/Pol编码序列包括修饰的Gag/Pol编码序列。

9.权利要求6所述的载体，其中所述cPPT/cTS是所述Gag/Pol编码序列的Pol编码序列的一部分。

10.权利要求2所述的载体，其中所述功能上有活性的慢病毒RNA包装元件包括Gag包装序列或其衍生物。

11.权利要求5所述的载体，进一步包括位于所述RRE的3′的异源启动子，其中所述异源启动子包括病毒启动子、人类启动子或合成的启动子或其组合。

12.一种药物组合物，包括根据权利要求1的慢病毒载体。

13.在受试者中诱导免疫反应的方法，包括给予根据权利要求12的药物组合物。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述慢病毒载体表达一个或多个感兴趣的基因以加强免疫，并且其中所述免疫反应包括体液免疫反应、细胞介导的免疫反应或其组合。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述体液免疫反应、细胞介导的免疫反应或其组合对感兴趣疾病或状况是特异的，该感兴趣的疾病或状况包括癌症、阿尔茨海默氏病、自身免疫疾病、心血管疾病、神经性疾病、纤维变性疾病、脂类代谢疾病、细胞外基质相关疾病和慢性关节变性疾病或其任何组合。

16.增加载体在宿主细胞中的免疫原性的方法，包括给予第一载体，接下来是根据权利要求1的慢病毒载体的一次或多次连续给予。

17.在需要其的哺乳动物中抑制或控制传染的复制性人类免疫缺陷病毒(HIV)复制的方法，包括给予包含根据权利要求1的慢病毒载体的药物组合物。

18.在需要其的受试者中增加载体的免疫原性的方法，包括

a)给予初始免疫；和

b)依次地给予加强免疫，

其中所述初始免疫或所述加强免疫中的至少一个包括根据权利要求1的慢病毒载体。

19.重组的慢病毒包装细胞，包括：

能在所述包装细胞中表达感兴趣的核酸序列以产生转导感受态病毒样颗粒的第一核酸分子；并且

其中所述细胞在缺少第二核酸分子时不产生转导感受态病毒样颗粒。

20.产生重组的慢病毒包装细胞的方法，包括：

将能在所述包装细胞中表达核酸序列以产生转导感受态病毒样颗粒的核酸；和至少一个能在所述包装细胞中表达感兴趣序列的核酸分子引入细胞，其中所述包装细胞产生转导感受态病毒样颗粒，该颗粒表达所述感兴趣核酸序列。