[发明专利]用于红细胞病原体灭活的改进猝灭方法

说明书

相关申请的交叉参考 

本申请要求2008年4月9日提交的发明名称为“用于红细胞病原体灭活的猝灭方法”的美国临时申请号No.61/043,666和2008年8月7日提交的发明名称为“用于红细胞病原体灭活的猝灭方法”的美国临时申请号No.61/087,034的优先权利益。在此将这两篇申请的全部内容引入作为参考，如同以下全面陈述一样。 

发明领域

本发明的领域涉及使用于处理血液制品的反应性亲电子化合物猝灭以使可能的病原体污染物灭活的方法。特别地，使用升高浓度的亲核化合物，如硫醇，以使红细胞组合物中的反应性亲电子化合物猝灭，然后将浓度降低，以降低红细胞(RBC)脱水。 

发明背景 

通过血液制品和其它生物材料传播疾病仍然是严重的健康问题。尽管在供血者筛选和血液检测方面已经取得了显著进展，但是诸如乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)和人免疫缺陷病毒(HIV)这类病毒在检测过程中因病毒或病毒抗体的低水平而仍然可能逃脱血液制品中的检测。除病毒的危害外，目前还没有适当的在指定用于输血的血液中筛选非病毒微生物(如细菌或原生动物)存在的经许可的测试。还存在如下的风险：迄今未知的病原体可能在供血中很普遍并且呈现出疾病传播的威胁，正如在认识到HIV通过输血传播的风险前发生的情况。 

已经将化学试剂引入血液或血浆中，以在血液制品的临床使用前使病原体灭活。通常，对于几乎没有红细胞内含物的血液制品(如血 小板和血浆)，使用光化学活化的化合物，如补骨脂素。对于含有红细胞的血液制品，已经研发了无需光活化的用于病原体灭活的化合物。这些化合物通常具有与病原体，更具体地说与病原体核酸反应的亲电子基团。例如，美国专利US 5,055,485中描述了使用芳基二醇环氧化物使细胞和含蛋白组合物中的病毒失活。可以使用原位产生亲电子试剂的其它化合物。LoGrippo等评价了氮芥CH₃-N(CH₂CH₂Cl)₂在病毒灭活中的应用。LoGrippo等，Proceedings of the Sixth Congress of the International Society of Blood Transfusion(国际输血学会第六次大会记录)，Bibliotheca Haematologica(Hollander编辑)，1958，pp.225-230。更有意义的是，美国专利5,691,132；6,177,441；6,410,219；6,143,490和6,093,725中描述了使用具有核酸靶向成分以及与核酸反应的亲电子成分的化合物，以灭活病原体，在此将这些文献的公开内容引入作为参考。美国专利US 6,093,725和6,514,987中描述了类似的化合物，其中该化合物的核酸靶向成分通过可水解连接物与反应性亲电子成分连接，在此将这些文献的公开内容引入作为参考。US专利6,136,586和US 6,617,157中描述了使用乙烯亚胺寡聚体和相关化合物使病原体灭活，在此将这些文献的公开内容引入作为参考。这些乙烯亚胺衍生的化合物通常具有提供反应性亲电子成分的氮丙啶基团和提供化合物的核酸靶向的多胺成分。一般类别的带有与核酸反应的亲电子或类似基团的核酸靶向化合物用于使血液、血液制品和各种生物来源样品中的病原体灭活。 

在一定程度上关注的是，尽管设计这些化合物与目标核酸特异性地反应，但是它们仍然可能与血液中的其它成分反应，如蛋白质或细胞膜。这些副反应是不利的，并且可能导致不良作用，如可以由免疫系统识别的蛋白质和细胞膜修饰。当反复使用这类经处理的血液制品时，它们可能使受血者对经处理的血液制品产生免疫反应。美国专利6,270,952；6,709,810；和7,293,985中描述了使这类灭活病原体的化合物猝灭以便降低任何这类不良副反应水平的方法，在此将这 些文献的公开内容引入作为参考。美国专利公开No.2006/0115466描述了这些猝灭条件的改进，其解决了对抗病原体灭活化合物产生的免疫应答。然而，尽管猝灭有效性得到了提高，但在一些情况中，发现处理过的红细胞由于提高的细胞脱水而具有降低的寿命，如通过降低的渗透脆性和降低的自选血细胞比容所测量的。 

因此，对减少病原体灭活化合物的不利亲电子副反应同时保持病原体灭活化合物灭活有害病原体的能力并且没有不利地影响经处理血液制品的活力和寿命的方法存在着需求。具体地，对猝灭红细胞中的病原体灭活化合物的改进方法存在着需求。 

发明概述