[发明专利]通过阻断肿瘤生长、血管发生和转移抵抗癌症的新型抗体

说明书

相关申请的交叉参考

本申请要求2008年4月4日提交的美国专利申请61/042,604和2008年11月10日提交的美国专利申请61/113,053的优先权，通过引用将它们的全部内容纳入本文。

对于联邦资助研发作出的发明的权益声明

本发明得到NIH/NCI SOMI Training Grant R25 CA 098010和NIH/NCI UCLA Prostate SPORE，P50 CA 092131的部分支持。政府享有本发明的某些权利。

发明背景

前列腺癌是最常见的恶性肿瘤，并且是美国男性的第二大癌症死因。前列腺癌是一种生物学和临床异质疾病。大多数患有这种恶性肿瘤的男性具有可能不会影响个体寿命的缓慢生长的肿瘤，但其他人会受到快速生长的转移性肿瘤的攻击。PSA筛选的局限性在于缺乏特异性以及无法预测哪些患者有患上激素难治性转移性疾病的风险。最近的研究提出，PSA诊断阈较低有可能增加前列腺癌诊断的数量，从而使缓慢进展癌症患者和侵袭性癌症患者之间的鉴定更加复杂(Punglia等，N Engl J Med，349：335-342(2003))。迫切需要能与临床结果相关联或能鉴别患有潜在的侵袭性疾病的患者的新血清和组织标记物(Welsh等，Proc Natl Acad Sci USA，100：3410-3415(2003))。

最近的表达概况研究提示，转移性肿瘤和非转移性肿瘤的表达特征(signature)可能存在于原发性肿瘤中(Ramaswamy等，Nat Genet，33：49-54(2003)；Sotiriou等，Proc Natl Acad Sci USA，100：10393-10398(2003))。使肿瘤易于转移到特定器官的其他特征也可能以一定概率存在于原发性肿瘤中(Kang等，Cancer Cell，3：537-549(2003))。这些最近的观察结果提示，可在疾病早期阶段鉴别转移前或激素难治性前列腺癌前的新型标记物。这些标记物也在转移性或激素难治性前列腺癌进展的生物学中发挥作用。与结果相关并在前列腺癌进展的生物学中发挥作用的存在于原发性肿瘤中的基因的最新例子包括EZH2和LIM激酶(Varambally等，Nature，419：624-629(2002)；Yoshioka等，Proc Natl Acad Sci USA，100：7247-7252(2003))。然而这两种基因都不是分泌型的。

为鉴定激素难治性前列腺癌的新候选血清或组织标记物，我们比较了成对的激素依赖性和激素难治性前列腺癌异种移植物的基因表达特征。LAPC-9异种移植物建立于成骨细胞骨转移，并在阉割免疫缺陷小鼠后从雄激素依赖进展到不依赖(Craft等，Cancer Research，付印(In Press，1999))。之前，其已用来鉴定前列腺癌的候选治疗靶。验证了差异表达基因，然后测试了相对于分泌蛋白或细胞表面蛋白的序列同源性。同时在激素难治性前列腺癌和膀胱癌中表达的N-钙粘蛋白的鉴定、表征和最初确认已被报道(WO/2007/109347)。

我们之前已经披露，我们将N-钙粘蛋白鉴定为前列腺癌和膀胱癌的假定诊断和治疗靶(WO/2007/109347)。我们之前披露的内容证实，该靶标在高风险性和进行性前列腺和膀胱肿瘤中显著表达，并显示该靶标的表达与预后不良和进展成雄激素非依赖性相关。尽管之前曾推测，N-钙粘蛋白可能是有用的治疗靶，但唯一存在的药物是肽拮抗剂，它对于前列腺癌不显示出任何临床前活性。据我们所了解，我们的发明首次提供了有效抵抗表达该靶标的癌症的单克隆抗体。此外，现有N-钙粘蛋白拮抗剂仅靶向该蛋白的第一胞外结构域。我们描述了靶向第一和第四胞外结构域的抗体。全部(抗体)都具有明显的抗肿瘤活性。据我们所知，这是第一次描述靶向第四胞外结构域的概念。我们的抗体可用作单一试剂、组合使用，并且在理论上可以与N-钙粘蛋白平行途径或下游途径的拮抗剂组合使用。

本发明包括多种针对N-钙粘蛋白第一和第四胞外结构域的单克隆抗体。这些抗体在前列腺癌和其他癌症的体内模型中阻断肿瘤生长、血管发生和转移。它们通过阻断负责肿瘤生长、侵袭、血管发生和转移的N-钙粘蛋白信号转导途径而发挥作用。所述抗体还可用于体内控制N-钙粘蛋白阳性肿瘤和/或用于组织诊断和预后。