[发明专利]在细胞培养中增加活力和生产率的方法有效
申请号: | 200980123085.X | 申请日: | 2009-06-12 |
公开(公告)号: | CN102083959A | 公开(公告)日: | 2011-06-01 |
发明(设计)人: | H·多濑;C·利;T·M·索尔瓦德麦莱恩 | 申请(专利权)人: | 森托科尔奥索生物科技公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C12N5/10;C12N5/08 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李进;刘健 |
地址: | 美国宾夕*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞培养 增加 活力 生产率 方法 | ||
1.一种在分批补料哺乳动物细胞培养中增加细胞活力的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A的哺乳动物细胞系。
2.一种在分批补料哺乳动物细胞培养中增加细胞活力的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A和E1B19K的哺乳动物细胞系。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述哺乳动物细胞系为中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1。
5.根据权利要求3所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1SV。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述哺乳动物细胞系为骨髓瘤细胞系。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述骨髓瘤细胞系为NS0。
8.根据权利要求6所述的方法,其中所述骨髓瘤细胞系为Sp2/0。
9.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述哺乳动物细胞系为杂交瘤细胞系。
10.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述细胞活力在所述分批补料细胞培养的第14天为至少50%。
11.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述细胞活力在所述分批补料细胞培养的第20天为至少40%。
12.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述活细胞密度在所述分批补料细胞培养的第15天为至少4×106个细胞/mL。
13.一种在中国仓鼠卵巢(CHO)分批补料细胞培养中增加分泌蛋白产生的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A和编码所述分泌蛋白的一个或多个基因的CHO细胞系。
14.一种在中国仓鼠卵巢(CHO)分批补料细胞培养中增加分泌蛋白产生的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A和E1B19K以及编码所述分泌蛋白的一个或多个基因的CHO细胞系。
15.一种在中国仓鼠卵巢(CHO)分批补料细胞培养中增加分泌蛋白产生的方法,所述方法包括培养过表达MDM2和E1B19K以及编码所述分泌蛋白的一个或多个基因的CHO细胞系。
16.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述分泌蛋白的滴度为至少600mg/L。
17.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1。
18.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1SV。
19.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述分泌蛋白为抗体重链和抗体轻链。
20.一种分离的多核苷酸,所述多核苷酸编码包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的多肽。
21.根据权利要求19所述的分离的多核苷酸,所述核苷酸具有SEQ IDNO:3中所示的序列或其互补序列。
22.一种载体,所述载体包含具有SEQ ID NO:3中所示序列的分离的多核苷酸。
23.根据权利要求21所述的载体,所述载体为表达载体。
24.一种分离的宿主细胞,所述宿主细胞包含根据权利要求21所述的载体。
25.一种分离的多肽,所述多肽包含具有SEQ ID NO:4中所示序列的多肽。
26.一种表达多肽的方法,所述方法包括以下步骤:
a.提供根据权利要求23所述的宿主细胞;以及
b.在足以表达所述包含SEQ ID NO:4中所示序列的多肽的条件下培养所述宿主细胞。
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