[发明专利]在细胞培养中增加活力和生产率的方法有效

专利信息
申请号: 200980123085.X 申请日: 2009-06-12
公开(公告)号: CN102083959A 公开(公告)日: 2011-06-01
发明(设计)人: H·多濑;C·利;T·M·索尔瓦德麦莱恩 申请(专利权)人: 森托科尔奥索生物科技公司
主分类号: C12N5/00 分类号: C12N5/00;C12N5/10;C12N5/08
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 李进;刘健
地址: 美国宾夕*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 细胞培养 增加 活力 生产率 方法
【权利要求书】:

1.一种在分批补料哺乳动物细胞培养中增加细胞活力的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A的哺乳动物细胞系。

2.一种在分批补料哺乳动物细胞培养中增加细胞活力的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A和E1B19K的哺乳动物细胞系。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述哺乳动物细胞系为中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系。

4.根据权利要求3所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1。

5.根据权利要求3所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1SV。

6.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述哺乳动物细胞系为骨髓瘤细胞系。

7.根据权利要求6所述的方法,其中所述骨髓瘤细胞系为NS0。

8.根据权利要求6所述的方法,其中所述骨髓瘤细胞系为Sp2/0。

9.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述哺乳动物细胞系为杂交瘤细胞系。

10.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述细胞活力在所述分批补料细胞培养的第14天为至少50%。

11.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述细胞活力在所述分批补料细胞培养的第20天为至少40%。

12.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述活细胞密度在所述分批补料细胞培养的第15天为至少4×106个细胞/mL。

13.一种在中国仓鼠卵巢(CHO)分批补料细胞培养中增加分泌蛋白产生的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A和编码所述分泌蛋白的一个或多个基因的CHO细胞系。

14.一种在中国仓鼠卵巢(CHO)分批补料细胞培养中增加分泌蛋白产生的方法,所述方法包括培养过表达MDM2D300A和E1B19K以及编码所述分泌蛋白的一个或多个基因的CHO细胞系。

15.一种在中国仓鼠卵巢(CHO)分批补料细胞培养中增加分泌蛋白产生的方法,所述方法包括培养过表达MDM2和E1B19K以及编码所述分泌蛋白的一个或多个基因的CHO细胞系。

16.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述分泌蛋白的滴度为至少600mg/L。

17.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1。

18.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述CHO细胞系为CHO-K1SV。

19.根据权利要求13至15所述的方法,其中所述分泌蛋白为抗体重链和抗体轻链。

20.一种分离的多核苷酸,所述多核苷酸编码包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的多肽。

21.根据权利要求19所述的分离的多核苷酸,所述核苷酸具有SEQ IDNO:3中所示的序列或其互补序列。

22.一种载体,所述载体包含具有SEQ ID NO:3中所示序列的分离的多核苷酸。

23.根据权利要求21所述的载体,所述载体为表达载体。

24.一种分离的宿主细胞,所述宿主细胞包含根据权利要求21所述的载体。

25.一种分离的多肽,所述多肽包含具有SEQ ID NO:4中所示序列的多肽。

26.一种表达多肽的方法,所述方法包括以下步骤:

a.提供根据权利要求23所述的宿主细胞;以及

b.在足以表达所述包含SEQ ID NO:4中所示序列的多肽的条件下培养所述宿主细胞。

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