[发明专利]生物活性剂的囊封方法

说明书

背景技术

很多药物在大脑或眼中的靶标处具有活性，为了使这些药物到达它们的靶标，它们必须穿过生物屏障，如血脑屏障。虽然一些分子能够通过生物屏障，但是还有一些不能有效或事实上根本不能穿过这些屏障的其它分子。许多药物也仅仅当直接进入靶标组织时才有效，且如果不能到达这个靶标组织，药物实际上也不能起作用。因此，由于不能穿过这样的生物屏障，很多可能有效的药物不能在临床上使用。

现有技术中已记述了很多方法以增强药物穿透这些生物屏障的能力。

一种方法是改变屏障本身的功能。例如，渗透剂或拟胆碱药物槟榔碱类(cholinomimetic arecolines)，其能打开血脑屏障或者改变血脑屏障的穿透性(Saija A等人，J Pharm.Pha.42：135-138(1990))。

其它的方法是修饰药物分子本身。例如，修饰蛋白以试图穿过血脑屏障，包括使这些蛋白糖基化或者形成前药(WO/2006/029845)。

还有另一方法是植入可控制释放的聚合物，其从基质系统直接将活性成分释放进入神经组织。然而，如果直接植入大脑或骨髓，这种方法是浸入性的且需要外科手术介入(sable等人，美国专利4,833,666)，这存在的问题是需要病人的同意，且通常仅仅是在大脑内随给予的药物一起进行定位输送，通常很快被排出(WO/2006/029845)。

为了克服这些局限，人们使用了药物载体系统，然而，靶标的药物传输的主要问题是通过网状内皮系统(RES)尤其是通过肝和脾的巨噬细胞的注射的载体的快速调理(opsonisation)和摄取。

因此，仍然需要一种有效的方法，以将大分子(如蛋白质)输送到大脑和眼中。具体而言，需要找到一种将大分子穿过血脑屏障的方法，所述大分子在进入大脑时仍能保留活性，以及还能提供所需要的释放动力学，保持蛋白质的稳定和活性，且能够回避清除机制。

附图说明

图1所示为通过动态光散射(DLS)从纳米粒子制剂中获得的粒度数据，表明在悬液中有通过空心法制备的纳米粒子存在。

图1(a)所示为通过动态光散射对纳米粒子悬液分析之后获得的相关图。

图1(b)所示为纳米粒子的多模态粒度分布(导出数据)，绘图以说明相对于粒度范围的粒子群(数量)的分布。

图1(c)所示为所示为纳米粒子的多模态粒度分布(导出数据)，绘图以说明相对于粒度范围的粒子群(数量)的分布。

图1(d)所示为所示为纳米粒子的多模态粒度分布(导出数据)，绘图以说明相对于粒度范围的粒子群(数量)的分布。

图2所示为经SEM分析的纳米粒子。

图3所示为经TEM的空心纳米粒子的图像，以及用于比较的固态PBCA纳米粒子的叠加图像。

图4所示为单克隆IgG1(抗-CD23)的囊封效果的测量结果。

图5所示为粒子的酶降解和通过ELISA的释放的酶的分析之后得到的释放曲线。

图6所示为通过二喹啉甲酸测定(BCA测定)在空心PBCA纳米粒子中测得的域抗体(鸡蛋溶菌酶dAb)的囊封效果曲线。

图7所示为为单克隆IgG1(抗-CD23)的囊封效果的测量结果。

发明内容

在本发明的一个方面中，提供一种在微粒载体中囊封生物活性剂的方法，如在纳米粒子中，或纳米粒子中和上，或用纳米粒子囊封蛋白和/或肽的方法，和通过在纳米粒子中，或纳米粒子中和上，或用纳米粒子囊封以输送蛋白和/或肽穿过血脑屏障的方法，以及通过在微粒载体中，或微粒载体中和上，或用微粒载体囊封以将蛋白和/或肽输送到眼中的方法。

在本发明的另一实施方式中，提供一种微粒载体，其包括粒子形成物质和生物活性剂如蛋白和/或肽，以将蛋白和/或肽从血液穿过血脑屏障输送到脑或输送到眼中。在本发明的再一实施方式中，提供纳米粒子的组合物以及它们在治疗中枢神经系统和/或眼的疾病或病症中的用途。

发明详述

本发明提供一种包括粒子形成物质和生物活性剂的微粒载体，以及所述微粒载体的制备方法。

在一个实施方式中，本发明提供一种包括在空腔的水相中的生物活性剂的聚合物微粒载体。

在本发明的另一实施方式中，其提供在微粒载体中囊封生物活性剂以用于眼输送的方法，该方法包括以下步骤：

a)在有机溶剂中溶解聚合物以形成聚合物溶液；

b)将含有生物活性剂的水溶液加入到聚合物溶液中以形成在连续有机相中的水相液滴的初级乳液；

c)使初级乳液与水介质混合形成W/O/W乳液；以及