[发明专利]用于电化学鉴定靶核苷酸序列的方法

权利要求书

1.用于电化学鉴定靶核苷酸序列的方法，其中：

-提供生物样品，其中可包含预定的靶核苷酸序列；

-提供包含游离核苷酸的可激活的扩增装置，以引起所述预定的靶核苷酸序列的复制和复制的靶核苷酸序列的形成；

-提供能与形成复制的靶序列的核苷酸反应的可氧化还原的化合物，并使所述可氧化还原的化合物与所述生物样品接触；

-激活所述可激活扩增装置；

-对所述生物样品施加电场以激活所述可氧化还原的化合物，并测量代表所述可氧化还原的化合物的电化学活性的电流，所述电流经过所述生物样品；和

-如果电流减弱，则确定存在所述预定的靶核苷酸序列；

所述方法的特征在于提供能在复制期间在形成所述复制的靶序列的核苷酸之间插入的可氧化还原的化合物，所述复制的靶序列引起所述插入的可氧化还原的化合物的电化学活性的抑制，由此电流减弱，

其中所述方法不是疾病的治疗或诊断方法，且

其中所述可氧化还原的化合物是具有二吡啶并吩嗪配体的过渡金属的复合物。

2.根据权利要求1的鉴定方法，其特征在于根据连续扩增循环激活所述可激活的扩增装置，而且在于，在每个扩增循环所述复制的靶序列加倍。

3.根据权利要求2的鉴定方法，其特征在于记录与电流减弱相对应的扩增循环数，从而确定所述生物样品中所述靶核苷酸序列的浓度。

4.根据权利要求1至3中任一项的鉴定方法，其特征在于其还包括下述步骤：

-为所述生物样品提供热能，以引起所述插入的可氧化还原的化合物的释放，并且对所述生物样品施加电场，以同时记录经过所述生物样品的电流的变化；和

-确定与记录的电流中最大变化相对应的热能Q的量，从而鉴定所述预定的靶核苷酸序列的性质。

5.根据权利要求4的鉴定方法，其特征在于向所述生物样品提供热能以引起所述生物样品温度的逐渐升高。

6.根据权利要求5的鉴定方法，其特征在于所引起的温度的逐渐升高是在40℃-98℃。

7.根据权利要求1的鉴定方法，其特征在于在所述生物样品的预定的温度测量代表所述可氧化还原的化合物的电化学活性的电流。

8.根据权利要求5或6或7的鉴定方法，其特征在于所述预定的温度显著低于与热能Q的预定量相对应的所述生物样品的温度。

9.根据权利要求1的鉴定方法，其特征在于使用伏安法测量所述电流。

10.根据权利要求9的鉴定方法，其特征在于使用方波伏安法。

11.根据权利要求1的鉴定方法，其特征在于引起所述预定的靶核苷酸序列的复制和核酸双链形式的复制的靶核苷酸序列的形成。

12.根据权利要求1的鉴定方法，其特征在于所述可激活扩增装置是PCR类型的。

13.用于通过电化学方法鉴定靶核苷酸序列的组件，所述组件包括：

-用于接收生物样品的装置(12,14)，所述生物样品可包含预定的靶核苷酸序列；

-可激活的扩增装置，其包含游离核苷酸，以引起所述预定的靶核苷酸序列的复制和复制的靶核苷酸序列的形成；

-能与形成复制的靶序列的核苷酸反应的可氧化还原的化合物，所述可氧化还原的化合物与所述生物样品接触；

-用于激活所述可激活扩增装置的激活装置(32,34,36)；

-用于对所述生物样品施加电场以激活所述可氧化还原的化合物的装置(20,22,24,26,28,36)，和用于测量代表所述可氧化还原的化合物的电化学活性的电流的装置，所述电流经过所述生物样品；和

-用于如果电流减弱则确定存在所述预定的靶核苷酸序列的装置(24,36)；

其特征在于所述可氧化还原的化合物选自能在复制期间插入形成所述复制的靶序列的核苷酸之间的化合物，所述复制的靶序列引起所述插入的可氧化还原的化合物电化学活性的抑制，由此电流减弱，

其中所述可氧化还原的化合物是具有二吡啶并吩嗪配体的过渡金属的复合物。

14.根据权利要求13的鉴定组件，其特征在于所述激活装置(32,34,36)适合于根据连续扩增循环激活所述可激活扩增装置，从而在每个扩增循环使所述复制的靶序列加倍。