[发明专利]具有降低的聚集的免疫球蛋白

说明书

技术领域

本公开涉及具有降低的聚集的改良免疫球蛋白。

背景技术

了解和控制蛋白质稳定性已成为生物学家、化学家和工程师渴望的努力。氨基酸取代和疾病之间的第一个联系(Ingram.Nature.1957，180(4581)：326-8.)提供了健康和疾病中对蛋白质稳定性的新的和重要的看法。基于蛋白质的药物——尤其基于免疫球蛋白的药物——的近来巨大增长已产生了新的挑战。将治疗用蛋白质以非常高的浓度在液体中贮藏几个月。非单体种类的百分比随着时间增加。随着聚集体形成，不但产品的效力降低，而且副作用诸如对给药的免疫应答可能发生。保证蛋白质药物的稳定性对于产品的贮存期限是必要的。

由于抗体在各种疾病治愈中的潜能，抗体目前构成人类治疗学中增长最快速的种类(Carter.Nature Reviews Immunology.2006，6(5)，343)。自从2001年，抗体市场一直在以35％的平均年增长率——所有种类生物技术药物之中最高的速率——增长(S.Aggarwal.Nature.BioTech.2007，25(10)1097)。

如疾病治疗所需要的，治疗用免疫球蛋白以高浓度在水溶液中制备和贮藏。然而，这些免疫球蛋白在这些条件下在热力学上是不稳定的，并由于聚集而降解。这种聚集进而导致抗体活性的降低，使药物无效，甚至能产生免疫应答。因此，存在迫切的需要来产生较少倾向于聚集的治疗用免疫球蛋白。

许多现存的用于防止免疫球蛋白聚集的方法采用蛋白制剂中添加剂的使用。这与本文描述的直接方法不同，在该直接方法中免疫球蛋白本身基于从分子模拟预测的易聚集区域被修饰。在抗体稳定中通常使用的添加剂是含氮碱基的盐诸如精氨酸、胍或咪唑(EP0025275)的盐。用于稳定的其它合适的添加剂是聚醚(EPA0018609)、甘油、白蛋白和硫酸葡聚糖(美国专利号4808705)、去垢剂和表面活性剂诸如基于聚山梨酯的表面活性剂(公布文本DA2652636和公布文本GB2175906(英国专利申请号GB8514349))、蛋白伴侣诸如GroEL(Mendoza.Biotechnol.Tech.1991，(10)535-540)、柠檬酸盐缓冲剂(WO9322335)或螯合剂(WO9115509)。尽管这些添加剂在一定程度上使蛋白在溶液中变得稳定，但是它们遭受到某些缺点诸如用于添加剂去除的另外处理步骤的必要性。

已经产生了最佳免疫球蛋白变体以提高其它特性诸如Fc受体的结合。举例来说，产生了260种抗体变体的属(包括L234和L235突变种类)并测试其对FcγRIIIa和FcγRIIb的结合的影响，如美国专利公布号2004/0132101(Lazar et al.)中所公开。然而，Lazar et al.没有测试任何抗体变体的聚集倾向。

因此，需要改良免疫球蛋白组合物，诸如抗体治疗，其为直接稳定的，不需要添加剂的使用。

概述

本文描述的是显示降低的聚集和/或增加的稳定性的改良免疫球蛋白，其满足了该需要。