[发明专利]功能性丝状真菌检测方法、含有功能性丝状真菌制品的评价方法和引物对无效
申请号: | 200980132700.3 | 申请日: | 2009-08-20 |
公开(公告)号: | CN102203247A | 公开(公告)日: | 2011-09-28 |
发明(设计)人: | 中崎清彦 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人静冈大学 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 苗堃;金世煜 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 功能 丝状 真菌 检测 方法 含有 制品 评价 引物 | ||
1.功能性丝状真菌检测方法,使用选自
(1)具有序列号1所示的碱基序列的多核苷酸和具有与其互补的碱基序列的多核苷酸和具有与它们实质相同的碱基序列的多核苷酸,
(2)具有序列号2所示的碱基序列的多核苷酸和具有与其互补的碱基序列的多核苷酸和具有与它们实质相同的碱基序列的多核苷酸,
(3)具有序列号3所示的碱基序列的多核苷酸和具有与其互补的碱基序列的多核苷酸和具有与它们实质相同的碱基序列的多核苷酸,和
(4)具有序列号4所示的碱基序列的多核苷酸和具有与其互补的碱基序列的多核苷酸和具有与它们实质相同的碱基序列的多核苷酸中的至少1个多核苷酸,检测试样中的功能性丝状真菌短矮鬼伞。
2.根据权利要求1所述的功能性丝状真菌检测方法,包括:使用由序列号1或序列号3所示的碱基序列或与其实质相同的碱基序列构成的多核苷酸,和由序列号2或序列号4所示的碱基序列或与其实质相同的碱基序列构成的多核苷酸所构成的引物对,进行PCR。
3.根据权利要求1所述的功能性丝状真菌检测方法,包括:使用由序列号1所示的碱基序列构成的多核苷酸,和由序列号2所示的碱基序列构成的多核苷酸所构成的引物对,进行PCR。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的功能性丝状真菌检测方法,所述功能性丝状真菌短矮鬼伞是短矮鬼伞GM-21(NITE BP-37)。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的功能性丝状真菌检测方法,所述试样是选自土壤试样、堆肥试样、培养物试样和固定化物试样中的至少1种。
6.含有功能性丝状真菌制品的评价方法,该方法是含有功能性丝状真菌短矮鬼伞的含有功能性丝状真菌制品的评价方法,包括:
对来源于所述含有功能性丝状真菌制品的试样,使用由序列号1或序列号3所示的碱基序列或与其实质相同的碱基序列构成的多核苷酸,和由序列号2或序列号4所示的碱基序列或与其实质相同的碱基序列构成的多核苷酸所构成的引物对,进行定量PCR,
基于所述定量的PCR的结果,评价所述含有功能性丝状真菌制品中的功能性丝状真菌短矮鬼伞的存在或浓度。
7.根据权利要求6所述的含有功能性丝状真菌制品的评价方法,所述引物对是由序列号1所示的碱基序列构成的多核苷酸,和由序列号2所示的碱基序列构成的多核苷酸所构成的引物对。
8.根据权利要求6或7所述的含有功能性丝状真菌制品的评价方法,所述含有功能性丝状真菌制品是通过包括以下步骤的方法获得的功能性堆肥:对处于细菌类活动限制状态的堆肥接种所述功能性丝状真菌短矮鬼伞,在所述堆肥内培养所述丝状真菌,使之选择性增殖。
9.根据权利要求6~8中任一项所述的含有功能性丝状真菌制品的评价方法,所述功能性堆肥还含有在丝状真菌的生长发育条件下可以活动的能够与丝状真菌共存生长的细菌类。
10.根据权利要求6~8中任一项所述的含有功能性丝状真菌制品的评价方法,所述功能性堆肥还包括在丝状真菌的生长发育条件下可以活动的能够与丝状真菌共存生长的细菌嗜盐枝芽孢杆菌I30-1(FERM BP-10975)。
11.由下述多核苷酸构成的引物对:
(1)具有序列号1或序列号3所示的碱基序列、或与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸,
(2)具有序列号2或序列号4所示的碱基序列、或与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸。
12.下述任意一个多核苷酸:
(1)具有序列号1所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸,
(2)具有序列号2所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸,
(3)具有序列号3所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸,
(4)具有序列号4所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸。
13.由选自下述多核苷酸中的至少2个构成的多核苷酸组:
(1)具有序列号1所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸,
(2)具有序列号2所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸,
(3)具有序列号3所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸,
(4)具有序列号4所示的碱基序列或与其互补的碱基序列的多核苷酸、或具有与它们实质相同的可以识别功能性丝状真菌短矮鬼伞的碱基序列的多核苷酸。
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