[发明专利]可调型基因自杀机制组合物和方法有效
申请号: | 200980133155.X | 申请日: | 2009-06-23 |
公开(公告)号: | CN102131927A | 公开(公告)日: | 2011-07-20 |
发明(设计)人: | 马修·J·贾卡洛内;斯坦利·马洛伊;辻晋吾 | 申请(专利权)人: | 瓦克星治疗有限公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/21;A61P31/04 |
代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人: | 王达佐;洪欣 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 可调 基因 自杀 机制 组合 方法 | ||
1.产生小细胞的细菌,所述细菌包含:
编码产生小细胞的基因产物的可表达的基因,所述基因产物调节隔膜形成、二分裂和染色体分离中的一种或多种;和
编码核酸内切酶的可表达的基因,
其中所述产生小细胞的细菌的染色体包含一个或多个所述核酸内切酶的识别位点。
2.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述产生小细胞的基因为转基因。
3.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述核酸内切酶基因为转基因。
4.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述产生小细胞的基因为细胞分裂基因。
5.如权利要求4所述的产生小细胞的细菌,其中所述细胞分裂基因选自ftsZ、sulA、ccdB和sfiC。
6.如权利要求5所述的产生小细胞的细菌,其中所述细胞分裂基因为ftsZ。
7.如权利要求6所述的产生小细胞的细菌,其中所述ftsZ包含SEQ ID NO:3的核酸序列。
8.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述产生小细胞的基因在诱导型启动子的控制下被表达。
9.如权利要求8所述的产生小细胞的细菌,其中所述启动子为温度敏感启动子。
10.如权利要求8所述的产生小细胞的细菌,其中所述启动子可被一种或多种化学化合物的存在诱导。
11.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述核酸内切酶基因位于所述产生小细胞的细菌的染色体上。
12.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述核酸内切酶为归巢核酸内切酶。
13.如权利要求12所述的产生小细胞的细菌,其中所述核酸内切酶选自I-CeuI、PI-SceI、I-ChuI、I-CpaI、I-SceIII、I-CreI、I-MsoI、I-SceII、I-SceIV、I-CsmI、I-DmoI、I-PorI、PI-TliI、PI-TliII和PI-ScpI。
14.如权利要求13所述的产生小细胞的细菌,其中所述核酸内切酶为I-CeuI。
15.如权利要求14所述的产生小细胞的细菌,其中所述I-CeuI包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列。
16.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述核酸内切酶在诱导型启动子的控制下被表达。
17.如权利要求16所述的产生小细胞的细菌,其中所述启动子为温度敏感启动子。
18.如权利要求16所述的产生小细胞的细菌,其中所述启动子可被一种或多种化学化合物的存在诱导。
19.如权利要求1所述的产生小细胞的细菌,其中所述产生小细胞的细菌为革兰氏阴性细菌。
20.如权利要求19所述的产生小细胞的细菌,其中所述革兰氏阴性细菌选自空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)、乳杆菌属种(Lactobacillus spp.)、淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)、沙门氏菌属种(Salmonella spp.)、志贺氏菌属种(Shigella spp.)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和大肠埃希菌(Escherichia coli)。
21.如权利要求19所述的产生小细胞的细菌,所述细菌包含编码参与脂多糖合成的基因产物的基因,其中所述基因与相应的野生型基因相比经过遗传修饰。
22.如权利要求21所述的产生小细胞的细菌,其中所述基因为编码基因产物的msbB基因,与相应的野生型细菌中的脂质A分子相比,所述基因产物导致细菌产生改变的脂质A分子。
23.如权利要求22所述的产生小细胞的细菌,其中与相应的野生型细菌中的脂质A分子相比,所述改变的脂质A分子对于肉豆蔻酸添加至所述脂多糖分子的脂质A部分而言是有缺陷的。
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