[发明专利]表征,特别是定量,由从组织再循环到血液循环系统中的血液巨噬细胞从组织中摄取到细胞内的分子标志物的方法,以及用于实施所述方法的分析设备无效
申请号: | 200980133748.6 | 申请日: | 2009-08-04 |
公开(公告)号: | CN102138071A | 公开(公告)日: | 2011-07-27 |
发明(设计)人: | W·布罗泽克 | 申请(专利权)人: | 辛米德研究有限公司 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 奥地利*** | 国省代码: | 奥地利;AT |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表征 特别是 定量 组织 再循环 血液 循环系统 中的 巨噬细胞 摄取 细胞内 分子 标志 方法 | ||
1.表征,特别是定量,由从组织再循环到血液循环系统中的血液巨噬细胞从组织中摄取到细胞内的分子标志物的方法,其特征在于下列步骤:
-向全血施加试剂,所述试剂抑制全血的凝集和/或凝结;
-从全血中选择和/或富集和/或分离出血液巨噬细胞或包含血液巨噬细胞的白细胞群体;
-进行所选择出的血液巨噬细胞或包含血液巨噬细胞的白细胞群体的穿孔和/或裂解,任选地,在事先对所选择出的血液巨噬细胞或包含血液巨噬细胞的白细胞群体进行可选的渗透化之后;
-在事先对血液巨噬细胞或包含血液巨噬细胞的白细胞群体进行穿孔和/或裂解之后,定性和定量地测定被吞噬的、非-血液巨噬细胞自身的标志物,即源自组织的分子标志物。
2.根据权利要求1的方法,其特征在于,借助于使用针对表面标志物CD16的抗体的正选择来进行血液巨噬细胞的选择和/或富集和/或分离。
3.根据权利要求2的方法,其特征在于,优选地,在使用针对表面标志物CD16的抗体进行正选择之后或任选地在这之前,使用针对表面标志物CD14的抗体进行正选择。
4.根据前述权利要求之一的方法,其特征在于,使用针对表面标志物CD56和/或CD57和/或CD161的抗体进行负选择,以便排除具有表面标志物CD56和/或CD57和/或CD161的细胞。
5.根据前述权利要求之一的方法,其特征在于,使用可偶联的,优选可逆地可偶联的磁珠来进行正或负选择。
6.根据前述权利要求1-4之一的方法,其特征在于,使用偶联在ELISA平板上的抗体来进行正或负选择。
7.根据前述权利要求之一的方法,其特征在于,在ELISA平板中定量地测定单核白细胞群体,优选地通过借助于ELISA平板阅读器测量乳酸脱氢酶活性来进行测定,特别优选地在其中进行分子标志物,特别是非-血液巨噬细胞自身的抗原的定性和定量测定的同一ELISA平板之中进行。
8.根据前述权利要求之一的方法,其特征在于,借助于ELISA平板阅读器和/或化学发光测量仪器来定量地测定被吞噬的、非-血液巨噬细胞自身的、源自组织的分子标志物的存在量。
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