[发明专利]表征，特别是定量，由从组织再循环到血液循环系统中的血液巨噬细胞从组织中摄取到细胞内的分子标志物的方法，以及用于实施所述方法的分析设备

说明书

本发明涉及根据权利要求1的前述部分的用于表征，特别是定量血液的单核白细胞(特别是血液巨噬细胞)的被吞噬的细胞内分子标志物的方法；以及根据权利要求13的前述部分的用于实施所述方法的分析设备。

在全血中，在其表面上表达蛋白CD14及CD16(FcγRIII)的细胞是可检测的。CD14是通常由单核细胞和巨噬细胞表达的细胞表面蛋白。细胞表面蛋白CD16使得细胞能够结合IgG抗体的恒定(Fc)区，所述CD16以两种同种型存在：在NK细胞、巨噬细胞和所谓的激活的单核细胞的表面上，作为CD16a(FcγRIIIA)；和在嗜中性粒细胞上，作为CD16b(FcγRIIIB)。

根据传统的学术观点，只有在组织中的巨噬细胞和血液的所谓的“激活的单核细胞”各自既表达CD14又表达CD16。迄今为止的学术观点将血液的CD14/CD16-阳性(CD14⁺CD16⁺)细胞绝对地视为“激活的单核细胞”，其(仍)未迁移到组织中，例如到发炎、感染或肿瘤位置处(Ziegler-Heitbrock，L.，2007.The CD14⁺CD16⁺ bloodmonocytes：Their role in infection and inflammation.J.Leukocyte Biol.81，584-592)。

然而更新的发现表明，激活的单核细胞为从组织再循环到血液循环系统中的巨噬细胞，其在其细胞内吞噬体中包含组织部分，例如上皮蛋白质，所述组织部分例如源自发炎或肿瘤位置(Herwig，R.，Horninger，W.，Rehder，P.等人，2005.Ability of PSA-positivecirculating macrophages to detect prostatecaneer.Prostate 62，290-298；Leers，M.P.G.，Nap，M.，Herwig，R.等人，2008.Circulating PSA-containing macrophages as a possible target forthe detection of prostate cancer：A three-colour/five-parameter flow cytometric study on peripheral blood samples.Am.J.Clin.Pathol.129，649-656)。与天然的CD14-阳性、CD16-阴性(CD14⁺CD16^-)单核细胞群体不同，这些细胞具有完全分化的组织巨噬细胞的形态学特征，并且由其所包含的(吞噬的)分子未在单核细胞中发现(Leers，M.P.G.，Nap，M.，Herwig，R.等人，2008.Circulating PSA-containing macrophages as a possible target forthe detection of prostate cancer：A three-colour/five-parameter flow cytometric study on peripheral blood samples.Am.J.Clin.Pathol.129，649-656)。

因此，在方法上，不仅为了分析性地检测，而且还为了分离和富集血液的CD14⁺CD16⁺细胞，可设想研究作为所有CD14⁺细胞的亚群的CD16⁺细胞以及研究作为所有CD16⁺细胞的子集的CD14⁺细胞。

此外，还已知，激活的单核细胞或血液巨噬细胞具有部分地弱的CD14表达(Ziegler-Heitbrock，L.，2007.The CD14⁺CD16⁺ bloodmonocytes：Their role in infection and inflammation.J.Leukocyte Biol.81，584-592)或者遭受CD14的完全丧失(Bazil和Strominger，1991：Shedding as a mechanism of down-modulationof CD14 on stimulated human monocytes.J.Immunol.147，1567-1574)。