[发明专利]具有提高的活性的β-葡糖苷酶变体及其用途

权利要求书

1.一种与野生型BGL1蛋白(SEQ ID No.2)的β-葡糖苷酶活性相比具有提高的β-葡糖苷酶活性的分离的或纯化的多肽，其特征在于它含有一种氨基酸序列，其中至少一个氨基酸与氨基酸序列SEQ ID No.2相比是经修饰的，所述经修饰的氨基酸选自氨基酸序列SEQ ID No.2的第225位、第238位、第240位和第241位。

2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于与所述氨基酸序列SEQ ID No.2相比，所述氨基酸序列的至少一个氨基酸是经修饰的，所述修饰选自Q225H、V238I、T240G和T241S。

3.根据权利要求1或2所述的多肽，其特征在于所述多肽还包含至少一个另外的经修饰的氨基酸，所述修饰的氨基酸选自氨基酸序列SEQ ID No.2的位置97、99、100、118、119、121、123、126、127、128、130、132、134、135、140、147、151、153、163、168、173、174、177、179、182、187、193、206、207、212、217和621。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的多肽，其特征在于所述多肽还包含至少一个另外的经修饰的氨基酸，所述修饰选自：V97I、Y99F、S100G、V118T、N119E、I121M、E123Q、Q126E、F127Y、I128L、E130A、V132A、A134G、S135C、S135V、I140L、P147A、T151I、Q153H、V163T、T168A、G173A、G173S、Q174E、N177E、I179L、V182A、V182N、T187C、L193V、N206D、P207V、L212M、T217L、L621F和L621T。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的分离的或纯化的多肽，其特征在于所述多肽选自：

选自SEQ ID No.4、SEQ ID No.6、SEQ ID No.8、SEQ ID No.10、SEQ ID No.12、SEQ ID No.14的氨基酸序列；或

-氨基酸序列SEQ ID No.X，其具有：

i)相对于SEQ ID No.4、6、8、10、12或14的长度，至少70％，优选75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的相同残基百分比；

ii)相对于SEQ ID No.X的长度，至少70％，优选75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％的相同残基百分比。

6.一种纯化的或分离的核酸，其特征在于其编码权利要求1-5中任一项所述的至少一种多肽。

7.一种载体，其特征在于其包含权利要求6所述的核酸。

8.一种分离的宿主细胞，其特征在于它包含权利要求1-5中任一项所述的至少一种多肽，或包含权利要求6所述的至少一种核酸，或包含权利要求7所述的至少一种载体。

9.根据权利要求8所述的分离的宿主细胞、其特征在于其选自：木霉菌属、曲霉菌属、脉孢菌属、腐质霉菌属、青霉菌属、镰孢菌属、热单孢菌属、芽孢杆菌属、假单胞菌属、埃希氏菌属、梭菌属、纤维单胞菌属、链霉菌属、亚罗酵母属、毕赤酵母和酵母属。

10.根据权利要求8或9所述的分离宿主细胞，其特征在于其选自：里氏木霉菌，绿色木霉菌，康氏木霉菌，黑曲霉菌，构巢曲霉菌，文氏曲霉菌，米曲霉菌，海枣曲霉菌，粗糙脉孢霉菌，灰色腐殖霉菌，嗜松青霉菌，草酸青霉菌，大肠杆菌，丙酮丁醇杆菌，解糖梭菌，拜氏梭菌，丁酸梭菌及其混合物。

11.根据权利要求1-5中任一项所述的多肽用于β-寡糖的水解的用途。

12.根据权利要求1-5中任一项所述的多肽用于将纤维二糖水解成葡萄糖的用途。

13.根据权利要求1-5中任一项所述的多肽用于制备生物燃料的用途。

14.一种对木质纤维素生物质起作用的酶组合物，所述酶组合物是由丝状真菌产生的，而且包含权利要求1-5中任一项所述的至少一种多肽。