[发明专利]宿主、转化体及其制造方法、以及含O-糖苷型糖链的异源蛋白质的制造方法有效
申请号: | 200980139731.1 | 申请日: | 2009-09-30 |
公开(公告)号: | CN102985541A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 竹川薰;浜祐子;东田英毅 | 申请(专利权)人: | 旭硝子株式会社 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/19;C12P21/02 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 刘多益 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 宿主 转化 及其 制造 方法 以及 糖苷 型糖链 蛋白质 | ||
1.一种宿主,该宿主是由omh1基因缺失或失活的粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)构成的宿主,其特征在于,用于通过基因工程方法使编码异源蛋白质的基因表达,再使糖链结合于所表达的异源蛋白质,从而生成具有呈O-Man-Gal双糖结构的O-糖苷型糖链的异源蛋白质。
2.一种转化体,其特征在于,以omh1基因缺失或失活的粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)作为宿主,包含编码异源蛋白质的基因。
3.如权利要求2所述的转化体,其特征在于,还包含编码在所述粟酒裂殖酵母中起作用的分泌信号的基因,该基因结合于编码所述异源蛋白质的基因的5’末端。
4.如权利要求2或3所述的转化体,其特征在于,与所述异源蛋白质相对应的野生型蛋白质是具有O-糖苷型糖链的蛋白质。
5.一种转化体的制造方法,其特征在于,以omh1基因缺失或失活的粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)作为宿主,将编码异源蛋白质的基因整合到所述宿主中。
6.如权利要求5所述的转化体的制造方法,其特征在于,在编码所述异源蛋白质的基因的5’末端侧具有编码在粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中起作用的分泌信号的基因。
7.如权利要求5或6所述的转化体的制造方法,其特征在于,与所述异源蛋白质相对应的野生型蛋白质是具有O-糖苷型糖链的异源蛋白质。
8.一种包含O-糖苷型糖链的异源蛋白质的制造方法,其特征在于,对权利要求2~4中的任一项所述的转化体进行培养,获取所生成的具有呈O-Man-Gal双糖结构的O-糖苷型糖链的异源蛋白质。
9.如权利要求8所述的包含O-糖苷型糖链的异源蛋白质的制造方法,其特征在于,无论与所生成的具有O-糖苷型糖链的异源蛋白质相对应的野生型异源蛋白质是否具有糖链,也无论该野生型异源蛋白质的糖链结构如何,所生成的具有O-糖苷型糖链的异源蛋白质的糖链均具有O-Man-Gal双糖结构。
10.如权利要求8或9所述的包含O-糖苷型糖链的异源蛋白质的制造方法,其特征在于,从培养转化体的培养液中获取具有O-糖苷型糖链的异源蛋白质。
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