[发明专利]用于癌症治疗的对接和锁定(DNL)疫苗

说明书

相关申请

本申请根据35U.S.C.119(e)要求2008年8月20日提交的序列号为61/090,487的美国临时专利申请的权益，该申请的全文以引用的方式并入本文。

背景技术

技术领域

本发明涉及用于癌症(如多发性骨髓瘤)治疗的基于树突状细胞的体内靶向抗原的疫苗的设计和产生。在优选的实施例中，通过对接和锁定(DNL)方法产生这些疫苗，其中效应子部分连接于源自AKAP蛋白的锚定域(AD)和源自蛋白激酶A(PKA)的二聚及对接域(DDD)部分。DNL复合体在DDD部分自发地二聚并与AD部分结合时产生，所得到的复合体的DDD与连接AD的效应子之间的化学计量比为2∶1。在更优选的实施例中，效应子部分包含人化抗CD74抗体和肿瘤相关异种抗原(如CD20异种抗原)。在最优选的实施例中，抗CD74抗体为hLL1抗体。DNL构建体可用于制备药物组合物、用于产生针对癌症(如多发性骨髓瘤(MM))的疫苗以及用于诱导针对表达肿瘤抗原的细胞(如患有多发性骨髓瘤和其它表达CD20的癌的患者中的CD20阳性癌细胞)的免疫反应。

相关技术

多发性骨髓瘤(MM)是恶性血液肿瘤，其特征是骨髓中的赘生性浆细胞的克隆样增生。尽管MM对许多化学治疗剂有反应，但其基本上仍难以治愈，并且大多数患者最终会复发，这是因为存在一小群MM癌干细胞，这些癌干细胞可在经标准或高剂量化学治疗下存活，并且对化学治疗药物具有抗性(Reece等，Leuk Lymphoma，2008，49：1470-85)。此少量的MM癌干细胞构成微小的残留病变并引起复发，最终导致所有治疗的失败。因此，根除MM癌干细胞可长期控制或甚至治愈MM。

近来，从MM患者的MM细胞系和初级骨髓中鉴别出一小群克隆型B细胞，这些细胞不表达特性浆细胞表面抗原CD138，但确实表达B细胞抗原CD20(Matsui等，Blood 2004，103：2332-6)。这一小群细胞对许多临床抗骨髓瘤药物有抗性，并且能够进行离体克隆性生长(Matsui等，Blood 2004，103：2332-6；Matsui等，Cancer Res.2008，68：190-7)以及在3D培养模型中克隆性生长(Kirshner等，Blood 2008，112：2935-45)，且能够离体地分化成MM细胞以及在植入NOD/SCID小鼠中(初次移植和再次移植期间)分化成MM细胞(Matsui等，Cancer Res.2008，68：190-7)。因此已提出这些CD138^negCD20⁺细胞代表假定的多发性骨髓癌干细胞(Huff和Matsui，J Clin Oncol.2008，26：2895-900)。

类似于其它癌干细胞，MM癌干细胞耐受许多化学治疗药物，并且是肿瘤再生长和复发的原因(Huff和Matsui，J Clin Oncol.2008，26：2895-900；Yang和Chang，Cancer Invest.2008，26：741-55)。需要可选择性地靶向并根除癌干细胞(如MM干细胞)的策略和方法。由于癌干细胞的多重抗药性，免疫疗法和疫苗接种可提供潜在的方式根除这些细胞，特别是在进行标准疗法和/或干细胞移植之后，肿瘤负荷大幅减少之时。需要探索针对性治疗多发性骨髓瘤的免疫疗法和疫苗接种的有效组合物及方法，特别是能够诱导针对MM癌干细胞的免疫反应、抑制或根除MM癌干细胞的组合物及方法。进一步需要探索针对性治疗一般癌症的免疫疗法和疫苗接种的有效组合物及方法。

发明内容

本发明公开了用于针对癌干细胞(如MM干细胞)的疫苗的方法和组合物，所述组合物是通过采用对接和锁定(DNL)方法制备的(Chang等，2007，Clin Cancer Res 13：5586s-91s)。DNL技术已用于产生适于体内应用的各种稳定和确定的复合体。在优选的实施例中，DNL复合体包含连接于二聚及对接域(DDD)或锚定域(AD)部分的抗CD74抗体或其抗原结合片段(如hLL1抗体)。DDD部分自发地二聚且每个DDD二聚体与AD部分结合。在更优选的实施例中，互补AD或DDD部分连接于CD20异种抗原(如下文进一步详述)，结果形成包含抗CD74部分和CD20异种抗原部分的DNL复合体。然而，技术人员会意识到，根据癌症的情况，可利用不同的异种抗原和/或抗体或抗体片段。抗体组分将DNL复合体导向诸如树突状细胞(DC)的抗原呈递细胞(APC)，而异种抗原组分的进程引起针对表达靶抗原的细胞的免疫反应。