[发明专利]用于进行细胞测定的方法有效
申请号: | 200980151813.8 | 申请日: | 2009-12-16 |
公开(公告)号: | CN102256481A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | P·J·塔特内尔;S·盖姆;A·M·多伊尔 | 申请(专利权)人: | 通用电气医疗集团英国有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 徐晶;林毅斌 |
地址: | 英国白*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 进行 细胞 测定 方法 | ||
1.一种深低温保藏细胞培养物,包括:
至少具有表面的容器、
承载在所述表面上的冷冻细胞,
其特征在于所述表面涂覆有聚赖氨酸。
2.权利要求1的细胞培养物,其中聚赖氨酸选自聚D-赖氨酸、聚L-赖氨酸和其混合物。
3.前述权利要求中任一项的细胞培养物,其中所述容器选自器皿、小瓶、微量滴定板和细胞培养板。
4.前述权利要求中任一项的细胞培养物,其中所述细胞是贴壁细胞。
5.前述权利要求中任一项的细胞培养物,其中所述细胞选自哺乳动物细胞、昆虫细胞、两栖动物细胞、鱼类细胞、爬行动物细胞和禽类细胞。
6.前述权利要求中任一项的细胞培养物,其中所述细胞是哺乳动物细胞。
7.权利要求6的细胞培养物,其中所述细胞选自CHO细胞、HEK293细胞和AD293细胞。
8.一种在细胞培养物中深低温保藏细胞的方法,所述方法包括以下步骤:
a)将含有细胞的培养基加到容器表面,使得所述细胞附着在所述表面上并形成细胞培养物,
b)加入深低温保藏培养基,和
c.)将所述细胞培养物的温度降低至-20℃或更低;
其特征在于在步骤a)之前用聚赖氨酸涂覆所述表面。
9.权利要求8的方法,其中聚赖氨酸选自聚D-赖氨酸、聚L-赖氨酸和其混合物。
10.权利要求8或9的方法,其中通过用聚赖氨酸的溶液洗涤所述表面来涂覆所述表面。
11.权利要求8-10中任一项的方法,其中所述容器选自器皿、小瓶、微量滴定板和细胞培养板。
12.权利要求8-11中任一项的方法,其中所述细胞是贴壁细胞。
13.权利要求8-12中任一项的方法,其中所述细胞选自哺乳动物细胞、昆虫细胞、两栖动物细胞、鱼类细胞、爬行动物细胞和禽类细胞。
14.权利要求8-13中任一项的方法,其中所述细胞是哺乳动物细胞。
15.权利要求8-14中任一项的方法,其中所述细胞选自CHO细胞、HEK293细胞和AD293细胞。
16.权利要求8-15中任一项的方法,还包括在低于-80℃的温度贮藏所述细胞培养物的步骤。
17.一种用于进行细胞测定的方法,所述方法包括以下步骤:
a)将含有细胞的培养基加到容器表面,使得所述细胞附着在所述表面上并形成细胞培养物,
b)加入深低温保藏培养基,
c)降低所述培养基的温度以冷冻所述细胞培养物,
d)将所述细胞培养物贮藏在低于-20℃的温度,
e)通过升高所述细胞培养物的温度解冻所述细胞;
f)对所述细胞进行细胞测定,
其特征在于在步骤a)之前用聚赖氨酸涂覆所述容器表面。
18.权利要求17的方法,其中所述细胞培养物贮藏在低于-80℃的温度。
19.权利要求17或18的方法,其中聚赖氨酸选自聚D-赖氨酸、聚L-赖氨酸和其混合物。
20.权利要求17-19中任一项的方法,其中所述容器选自器皿、小瓶、微量滴定板和细胞培养板。
21.权利要求17-20中任一项的方法,其中所述细胞是贴壁细胞。
22.权利要求17-21中任一项的方法,其中将步骤a)的细胞附着在一种或多种微载体上。
23.权利要求22的方法,其中用聚赖氨酸涂覆所述一种或多种微载体。
24.权利要求17-23中任一项的方法,其中所述细胞选自哺乳动物细胞、昆虫细胞、两栖动物细胞、鱼类细胞、爬行动物细胞和禽类细胞。
25.权利要求17-24中任一项的方法,其中所述细胞是哺乳动物细胞。
26.权利要求17-25中任一项的方法,其中所述细胞选自CHO细胞、HEK293细胞和AD293细胞。
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