[发明专利]siNA介导的VEGF-C和RhoA的敲低对VEGF-A分泌、血管生成和/或新血管生成的抑制

说明书

序列表

本申请包含已通过EFS-Web提交的序列表，该序列表在此通过引用以其整体并入。所述ASCII副本，于2009年11月18日创建，名称为RLS PCT037.txt，大小为7,300字节。

相关专利申请的交叉引用

本申请要求于2008年11月21日提交的临时印度申请第2459/MUM/2008号的利益，其在此以其整体通过引用并入。

发明领域

本发明涉及诸如短干扰核酸(siNA)分子的短核酸分子调节基因和蛋白表达的用途，包括调节RhoA和/或VEGF-C基因表达的小核酸分子的化合物、组合物和协同组合。本发明的化合物和方法单独或与其它疗法联合用在调节Rho-A、VEGF-C和VEGF-A表达和分泌、血管生成和/或新血管生成方面。

发明背景

血管生成

血管生成是新血管形成或现有血管扩张，而淋巴管生成是淋巴管中的等效过程。血液和淋巴性血管生成的过程由一些关键的血管生成因子严格调节。抗血管生成因子包括血小板反应蛋白、血小板因子IV、TNF-α(体外)、TGF-β、干扰素、制管张素、整联蛋白抑制物、16kD促乳素、内皮抑制素和ANG-2。某些类固醇可抑制血管生成。

血管和淋巴管的促血管生成因子包括FGF(成纤维细胞生长因子)、VEGF(血管内皮生长因子)、PDGF(血小板衍生生长因子)和血管生成素家族。

已知FGF家族在多种细胞类型上具有广泛的生物功能。FGF-I和FGF-2是生物体内潜在的血管生成因子，虽然这些因子在血管生成的调节中的生理和病理关联性是不清楚的。

VEGF家族包括至少五种结构相关的蛋白。VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D和胎盘生长因子(PlGF)。这些分子与表现不同特异性和功能的一系列细胞表面受体VEGFR-1、VEGFR-2和VEGFR-3相互作用。VEGF-C和VEGF-D与VEGFR-2和VEGFR-3均结合并促进血管和淋巴管的形成。VEGF-B和PlGF与VEGFR-1结合并调节VEGF-A的作用，但它们在血管生成的刺激中的作用仍存在争议。除了其刺激血管生成的能力，VEGF-A作为潜在的血管通透因子(VPF)行使作用。大量的工作表明VEGFR-2是介导VEGF-A诱导的血管生成效应和通透效应的受体。支持此观点，仅与VEGFR-1相互作用的VEGF-B和PlGF缺少血管生成活性和血管通透活性。毛细管中的VEGF-A、VEGF-C、和FGF-2决定了内皮细胞层的厚度(按照重要性排序，VEGF-A＜VEGF-C＜FGF-2)。与血液毛细管不同，由VEGF-C产生的淋巴毛细管缺少穿孔(fenestration)。这可能是由于血管生成和淋巴管生成所用的信号通路的差异。高血糖、低氧或较高水平的胰岛素提高了视网膜内皮细胞和视网膜上皮细胞中的VEGF-C的表达，且增高的VEGF-C抑制了内皮细胞凋亡。

血管生成的调节是许多正常过程和病理过程的关键，所述过程包括胚胎发育、创伤愈合、肿瘤生长和转移、风湿性关节炎、糖尿病性视网膜病变、动脉粥样硬化以及缺血性心肌、后肢肌肉和脑的血管再造。淋巴管生成对于肿瘤由淋巴系统蔓延至关重要。

已显示新生血管形成引起或加剧了眼疾病，所述眼疾病包括，但不局限于，黄斑变性、新生血管性青光眼、糖尿病性视网膜病变、近视性变性和沙眼。Norrby APMIS 105，417-437(1997)。已报道患有糖尿病性视网膜病变和其它视网膜疾患的绝大多数患者的眼内液含有高浓度的VEGF-A。Aiello等人，New Engl.J.Med.331，1480(1994)。已报道患有视网膜缺血的患者中具有增高的水平的VEGF mRNA。Miller等人，Am.J.Pathol.145，574(1994)。因此，VEGF-A可能在眼疾病中具有直接的作用。其它因子，包括刺激VEGF合成的那些，可能也会引起这些适应症。

RhoA