[发明专利]具有胞内可裂解的键的免疫共轭物

说明书

发明人：Serengulam V.Govindan，Sung-Ju Moon和David M.Goldenberg

相关申请

本申请要求2009年2月13日提交的美国临时专利申请61/207,890的权益，其原文通过引用全文并入本文。

发明领域

本发明涉及靶向不同癌细胞、传染病生物体的能力改进和/或用于治疗自身免疫性疾病的治疗共轭物，该共轭物包含靶向(结合)部分和属于药物的喜树碱基团的治疗部分。靶向部分与治疗部分经由增加治疗效力的胞内可裂解的键连接。

发明背景

多年来，在特异性靶向药物疗法领域中科学家的一个目的是使用单克隆抗体(MAb)用于向人癌症特异性递送毒性剂。已经开发了肿瘤相关MAb与适当毒性剂的共轭物，但在癌症的治疗中成败参半，在其他疾病诸如传染病和自身免疫性疾病中几乎无应用。毒性剂是最通常的化疗药物，尽管还已经将发射粒子的放射性核素、或细菌或植物毒素与MAb共轭，尤其是用于癌症疗法(Sharkey和Goldenberg，CA Cancer J Clin.2006 Jul-Aug；56(4)：226-243)，以及最近，利用放射免疫共轭物用于某些传染病的临床前治疗(Dadachova和Casadevall，Q J Nucl Med Mol Imaging 2006；50(3)：193-204；通过引用并入本文)。

利用MAb-化疗药物共轭物的益处是：(a)化疗药物本身结构是充分确定的；(b)化疗药物通常在远离MAb抗原结合区的特定位点利用非常确定的共轭化学与MAb蛋白连接；(c)与涉及MAb和细菌或植物毒素的化学共轭物相比，MAb-化疗药物共轭物的制备更具有可重复性，因此更有商业发展前途并且容易获得管理批准；和(d)MAb-化疗药物共轭物的系统毒性比放射性核素MAb共轭物的数量级低。

对蛋白-药物共轭物的早期工作指出，一旦被靶细胞内化，为了蛋白-化疗药物共轭物成为有用的治疗，药物优选地以它原来的形式释放。Trouet等(Proc.Natl.Acad.Sci.USA 79：626-629(1982))显示了在药物和靶向部分之间利用特定肽接头的益处，所述肽接头被溶酶体裂解以释放出完整药物。尤其是，根据肿瘤中的pH经常低于正常生理pH的发现，开发了使用温和的酸可裂解的接头(如包含腙的接头)制备的MAb-化疗药物共轭物(Willner等，美国专利5,708,146；Trail等(Science 261：212-215(1993))。第一种批准的MAb-药物共轭物吉妥珠单抗奥佐米星，在抗-CD33抗体人化P67.6与强效的卡奇霉素衍生物之间掺入相似的酸不稳定性腙键。Sievers等，J Clin Oncol.19：3244-3254(2001)；Hamann等，Bioconjugate Chem.13：47-58(2002)。在一些情况，制备在化疗药物与MAb之间具有还原性不稳定的阻隔的二硫键的MAb-化疗药物共轭物(Liu等，Proc Natl Acad Sci USA 93：8618-8623(1996))。

又一种可裂解的接头包括组织蛋白酶B-不稳定的二肽间隔物，诸如Phe-Lys或Val-Cit，类似于Trouet等的包含1至4个氨基酸的溶酶体不稳定性肽间隔物，在药物与二肽之间另外掺入可折叠的间隔物(Dubowchik等，Bioconjugate Chem.13：855-869(2002)；Firestone等，美国专利6,214,345B1；Doronina等，Nat Biotechnol.21：778-784(2003))。后一种方法也可用于制备喜树碱的免疫共轭物(Walker等，Bioorg Med Chem Lett.12：217-219(2002))。已经研究的另一种可裂解的部分是掺入抗体与化疗药物之间的接头中的酯键。Gillimard和Saragovi已经发现，当紫杉醇的酯与抗-大鼠p75MAb即MC192或抗-人TrkA MAb即5C3共轭时，发现共轭物表现靶特异性毒性。Gillimard和Saragovi，Cancer Res.61：694-699(2001)。