[发明专利]诱导淀粉样前体蛋白裂解以形成新片段的方法

权利要求书

1.在诱导APP裂解以制备约17千道尔顿(kDa)的APP羧基端片段中使用的通式(I)的杂环化合物或其药物可接受的盐、水合物或前药：

其中所述约17kDA的片段包含APP的羧基端氨基酸序列以及β-淀粉样氨基酸序列，以及

其中各个R_x、R₁、R₂、R₃、R₄如本文所定义。

2.如权利要求1所述的用途，其中所述杂环化合物为螺(咪唑并(1，2-a)吡啶-2(3H)-酮-3，2’-茚满)。

3.如权利要求1所述的用途，其中所述杂环化合物的所述用途导致淀粉样前体蛋白的Aβ_1-42、Aβ_1-40、C99片段中的一种或多种或淀粉样前体蛋白的C83片段的产量减少。

4.如权利要求1所述的用途，其中给予所述化合物的个体患有阿尔茨海默症。

5.如权利要求4所述的用途，其中所述个体已诊断为患有阿尔茨海默氏症。

6.分离的约17千道尔顿的淀粉样前体蛋白片段，其包含淀粉样前体蛋白的羧基端氨基酸序列以及β-淀粉样氨基酸序列。

7.组合物，其包含权利要求6所述的片段。

8.用于筛选裂解淀粉样前体蛋白以生成约17千道尔顿的淀粉样前体蛋白片段的化合物的方法，所述方法包括：

(a)将产生淀粉样前体蛋白或其片段的细胞暴露于试验化合物，以及

(b)测定约17千道尔顿片段的量，

其中所述约17千道尔顿的片段包含淀粉样前体蛋白羧基端氨基酸序列以及β-淀粉样氨基酸序列，以及

其中相对于未暴露于所述化合物的细胞中的约17千道尔顿片段的量，暴露于所述化合物的细胞中的约17千道尔顿片段的量增加表明所述化合物诱导淀粉样前体蛋白裂解以生成所述约17千道尔顿的片段。

9.如权利要求8所述的方法，其还包括(c)相对于未暴露于所述化合物的细胞中的淀粉样前体蛋白的Aβ_1-42、Aβ_1-40、C99片段或所述淀粉样前体蛋白的C83片段的量，测定暴露于所述化合物的细胞中的淀粉样前体蛋白的Aβ_1-42、Aβ_1-40、C99片段中的一种或多种或所述淀粉样前体蛋白的C83片段的量是否减少。

10.如权利要求1所述的方法，其中体外进行所述筛选方法。

11.如权利要求8所述的方法，其还包括(c)相对于未暴露于所述化合物的细胞的细胞培养基中淀粉样前体蛋白的Aβ_1-42、Aβ_1-40、C99片段或所述淀粉样前体蛋白的C83片段的量，测定暴露于所述化合物的细胞的细胞培养裂解液中淀粉样前体蛋白的Aβ_1-42、Aβ_1-40、C99片段中的一种或多种或所述淀粉样前体蛋白的C83片段的量是否减少。

12.如权利要求8所述的方法，其中以高流通量的方式进行所述筛选方法。

13.用于筛选裂解淀粉样前体蛋白以生成约17千道尔顿的APP片段的化合物的方法，所述方法包括：

(a)将产生淀粉样前体蛋白或其片段的细胞暴露于试验化合物，以及

(b)测定所述约17千道尔顿的片段，

其中所述约17千道尔顿的片段包含所述淀粉样前体蛋白羧基端氨基酸序列以及β-淀粉样氨基酸序列，以及

其中相对于未暴露于所述化合物的细胞中约17千道尔顿片段的缺少，暴露于所述化合物的细胞中约17千道尔顿片段的存在表明所述化合物诱导淀粉样前体蛋白裂解以生成所述约17千道尔顿的片段。