[发明专利]基于PCV 2的用于治疗猪的方法和组合物

权利要求书

1.一种重组表达载体，其包含与启动子可操作连接的编码修饰型PCV2ORF2的核酸序列，其中

a.修饰型PCV2ORF2中野生型PCV2ORF2的核定位信号已经被去除或修饰，以容许截短型ORF2蛋白在表达后即被分泌；或者

b.修饰型PCV2ORF2中所述的核定位信号已经被去除并替换为指导PCV2ORF2在受感染细胞的细胞表面上表达的信号疏水性信号。

2.权利要求1的重组表达载体，其中所述ORF2的核定位信号已经被替换为疏水性信号序列和切割位点。

3.权利要求1的重组表达载体，其中所述ORF2的核定位信号被替换为选自下组的信号序列：鸡γ干扰素、猪γ干扰素、以及流感病毒的HA蛋白。

4.权利要求1的重组表达载体，其中所述载体是病毒载体。

5.权利要求4的重组表达载体，其中所述病毒载体选自下组：腺病毒载体、腺伴随病毒载体、慢病毒载体、疱疹病毒载体、痘病毒载体。

6.权利要求5的重组表达载体，其中所述腺病毒载体是选自PAdV1、PAdV2、PAdV3、PAdV4、和PAdV5的猪腺病毒载体。

7.权利要求6的重组表达载体，其中所述猪腺病毒载体是PadV3。

8.权利要求7的疫苗，其中所述PAVd3是有复制能力的PadV3。

9.权利要求7的重组表达载体，其中所述编码所述修饰型PCV2ORF2的核酸序列被插入PadV3中的非必需序列中。

10.权利要求9的重组表达载体，其中所述PAdV-3的非必需序列选自下组：猪腺病毒基因组的E3区、E4的ORF1-2和4-7、E4末端与ITR之间的区域。

11.权利要求7的重组表达载体，其中所述PAdV3是重组PAdV3，其包含对于所述PAdV3而言为天然的纤维基因并进一步包含对所述腺病毒而言为异源的第二纤维基因，其中所述第二纤维基因是通过使所述重组腺病毒在稳定表达所述第二纤维基因的细胞系中生长而由该重组腺病毒所获得的。

12.权利要求1的重组表达载体，其中所述核酸包含SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：5的序列。

13.权利要求1的重组表达载体，其进一步包含编码用于引发猪体内的免疫应答的其他抗原的核酸。

14.一种组合物，其包含：如权利要求1所述的第一重组表达载体，以及包含用于引发猪体内的免疫应答的其他抗原的第二重组表达载体。

15.一种用于引发猪体内针对猪圆环病毒(PCV2)感染的保护性应答的疫苗，其包含兽医学上可接受的运载体或赋形剂以及权利要求1-13中任一项的重组表达载体。

16.一种用于引发猪体内针对PCV2感染的保护性应答的疫苗，其包含权利要求14的组合物。

17.权利要求15的疫苗，还包括一种或多种用于免疫接种猪的其他抗原，其中所述一种或多种其他抗原作为所述疫苗的兽医学上可接受的运载体或赋形剂中的蛋白质组分提供。

18.一种用于保护猪以对抗由PCV-2ORF2导致的疾病的疫苗，所述疫苗包含重组病毒载体，该载体包含与启动子可操作连接的包含编码膜锚定域的核酸的疏水性信号序列、用于与所述疏水性信号序列合框地插入修饰型PCV2ORF2的多克隆位点、聚腺苷酸化信号，以及病毒基因组；其中所述修饰型PCV-2ORF2缺少核定位信号。

19.权利要求18的疫苗，其中所述载体还包含位于所述用于修饰型PCV-2ORF2的克隆位点的紧邻上游的切割序列，其中来自所述载体的PCV-2ORF2表达产物生成可溶性基因产物。

20.一种用于保护猪以对抗PCV-2相关疾患的疫苗，所述疫苗包含重组猪腺病毒3载体，该载体包含与启动子可操作连接的包含编码膜锚定域的核酸的疏水性信号序列，以及与所述疏水性信号序列合框地插入的编码缺少NLS序列的截短型PCV2ORF2的核酸，聚腺苷酸化信号；以及猪腺病毒3基因组。

21.权利要求17、18或20的疫苗，其中所述疫苗配制为用于气雾剂施用。