[发明专利]修饰型生物素结合蛋白

权利要求书

1.一种修饰型生物素结合蛋白，其是包含SEQ ID NO：2所述的氨基酸序列，或在该序列中具有一个至数个氨基酸突变的氨基酸序列，或与该序列具有80％以上的同一性的氨基酸序列，且显示生物素结合活性的蛋白质，且其具有选自下组的取代：

1)SEQ ID NO：2的36位的丝氨酸残基取代成不形成氢键的氨基酸残基；

2)SEQ ID NO：2的80位的色氨酸残基取代成亲水性氨基酸残基；

3)SEQ ID NO：2的116位的天冬氨酸残基取代成不形成氢键的氨基酸残基；

4)SEQ ID NO：2的46位的脯氨酸残基取代成苏氨酸、丝氨酸或者酪氨酸残基、以及78位的苏氨酸残基取代成不形成氢键的氨基酸残基；

5)SEQ ID NO：2的46位的脯氨酸残基取代成苏氨酸、丝氨酸或者酪氨酸残基、以及116位的天冬氨酸残基取代成不形成氢键的氨基酸残基：以及

6)SEQ ID NO：2的46位的脯氨酸残基取代成苏氨酸、丝氨酸或者酪氨酸残基、78位的苏氨酸残基取代成不形成氢键的氨基酸残基、以及116位的天冬氨酸残基取代成不形成氢键的氨基酸残基。

2.根据权利要求1所述的修饰型生物素结合蛋白，其选自下组：

1-a)SEQ ID NO：2的36位的丝氨酸残基被取代成丙氨酸的修饰型生物素结合蛋白(TM2 S36A)；

2-a)SEQ ID NO：2的80位的色氨酸残基被取代成赖氨酸的修饰型生物素结合蛋白(TM2 W80K)；

3-a)SEQ ID NO：2的116位的天冬氨酸残基被取代成丙氨酸的修饰型生物素结合蛋白(TM2 D116A)；

4-a)SEQ ID NO：2的46位的脯氨酸残基被取代成苏氨酸、且78位的苏氨酸残基被取代成丙氨酸的修饰型生物素结合蛋白(TM2 P46T-T78A)；

5-a)SEQ ID NO：2的46位的脯氨酸残基被取代成苏氨酸、且116位的天冬氨酸残基被取代成丙氨酸的修饰型生物素结合蛋白(TM2P46T-D116A)；以及

6-a)SEQ ID NO：2的46位的脯氨酸残基被取代成苏氨酸、78位的苏氨酸残基被取代成丙氨酸、且116位的天冬氨酸残基被取代成丙氨酸的修饰型生物素结合蛋白(TM2 P46T-T78A-D116A)。

3.根据权利要求1或2所述的修饰型生物素结合蛋白，其满足以下性质中的一个至全部：

i)可以使用生物素进行纯化；

ii)保持由SEQ ID NO：2的记载的氨基酸序列构成的蛋白质的四聚体结构；

iii)对蛋白酶具有耐受性；以及

iv)在大肠杆菌的可溶性级分中显示高表达。

4.一种修饰型生物素结合蛋白，其是包含SEQ ID NO：2所述的氨基酸序列，或在该序列中具有一个至数个氨基酸突变的氨基酸序列，或与该序列具有80％以上的同一性的氨基酸序列，且显示生物素结合活性的蛋白质，且其具有下述取代：

6)SEQ ID NO：2的78位的苏氨酸残基取代成不形成氢键的氨基酸残基。

5.根据权利要求4所述的修饰型生物素结合蛋白，其是

6-a)SEQ ID NO：2的78位的苏氨酸残基被取代成丙氨酸残基的修饰型生物素结合蛋白(TM2 T78A)。

6.根据权利要求4或5所述的修饰型生物素结合蛋白，其满足下述性质中的一个至全部：

i)可以使用生物素进行纯化；

ii)保持由SEQ ID NO：2的记载的氨基酸序列构成的蛋白质的四聚体结构；

iii)对蛋白酶具有耐受性；以及

v)与由SEQ ID NO：2的记载的氨基酸序列构成的蛋白质相比，具有更高的耐热性。