[发明专利]用于免疫治疗的HLA-B*0702共有表位的鉴定、优化与应用

权利要求书

1.一种用于鉴定HLA-B^*0702限制性肽的方法，所述HLA-B^*0702限制性肽可引发针对来自单个多基因家族的至少两种抗原的细胞毒性应答，所述方法至少包括下述步骤：

(i)在所述多基因家族的基因中鉴定在第2位为P和在第3位为选自R、K、H以及M的氨基酸的9个或10个氨基酸的肽；

(ii)比对步骤(i)中获得的序列；

(iii)在步骤(i)中获得的所述肽中鉴定具有至少两种肽的组，其中至少一种肽是“基本共有肽”，即，其抗原性区域至多有一个残基不同于所述组的其他肽，其中所述抗原性区域在具有9个氨基酸的肽中为从第4位延伸至第8位，在具有10个氨基酸的肽中为从第4位延伸至第9位；

其中所述至少一个基本共有肽引发针对所述多基因家族的至少两种抗原的细胞毒性应答。

2.根据权利要求1所述的方法，其用于鉴定可引发针对来自所述多基因家族的至少三种抗原的细胞毒性应答的HLA-B^*0702限制性肽，其中，步骤(iii)中选出的具有肽的组包含来自所述多基因家族的至少三个基因的肽。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤(iii)中选出的具有肽的组包含至少两种具有不同抗原性区域的肽。

4.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其还包括测定所述基本共有肽的免疫原性的步骤(iv)。

5.根据权利要求4所述的方法，其还包括增强所述基本共有肽的免疫原性的步骤(v)。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，步骤(iii)中选出的所述基本共有肽是其N末端为除P外的任何氨基酸的非免疫原性表位，且步骤(v)为使用亮氨酸取代所述表位的C末端残基。

7.根据权利要求5所述的方法，其中，步骤(iii)中选出的所述基本共有肽是C末端氨基酸选自L、A、I、V、M、C和T的非免疫原性表位，且其中步骤(v)为使用丙氨酸取代所述表位的N末端残基。

8.根据权利要求1至7任一项所述的方法，其中，所述多基因家族是MAGE-A家族。

9.通过权利要求1至3任一项所述的方法鉴定出的分离肽，其中，所述基本共有肽选自MPKTGFLII(SEQ ID No：2)，MPKTGLLII(SEQ ID No：3)，FPKTGLLII(SEQ ID No：4)，VPKTGLLII(SEQ ID No：5)，MPKAGLLII(SEQ ID No：6)，MPKTGILIL(SEQ ID No：7)，MPKTGFLIIV(SEQ ID No：8)，MPKTGFLIII(SEQ ID No：9)，MPKTGLLIIV(SEQ ID No：10)，FPKTGLLIIV(SEQ ID No：11)，VPKTGLLIIV(SEQ ID No：12)，MPKAGLLIIV(SEQ ID No：13)，MPKTGILILI(SEQ ID No：14)，GPRALAETS(SEQ ID No：15)，GPRALIETS(SEQ ID No：16)，GPRALVETS(SEQ ID No：17)，GPRALAETSY(SEQ ID No：18)，GPRALIETSY(SEQ ID No：19)，GPRALVETSY(SEQ ID No：20)，EPRKLLTQD(SEQ ID No：21)，HPRKLLTQD(SEQ ID No：22)，DPKKLLTQH(SEQ ID No：23)，DPKKLLTQY(SEQ ID No：24)，HPKKLLMQD(SEQ ID No：25)，EPRKLLTQDL(SEQ ID No：26)，EPRKLLTQDW(SEQ ID No：27)，HPRKLLTQDL(SEQ ID No：28)，HPKKLLMQDL(SEQ ID No：29)，DPKKLLTQHF(SEQ ID No：30)，DPKKLLTQYF(SEQ ID No：31)。

10.通过权利要求5至7任一项所述的方法鉴定出的分离肽，其中，所述分离肽选自SEQ ID NO：32-67。

11.一种嵌合多肽，其包含一个、两个、三个或更多个权利要求9所述的HLA-B^*0702限制性表位。