[发明专利]通过过表达琥珀酸脱氢酶增加甲硫氨酸生产无效
申请号: | 200980163237.9 | 申请日: | 2009-12-30 |
公开(公告)号: | CN102712941A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | R.菲格 | 申请(专利权)人: | 代谢探索者公司 |
主分类号: | C12P13/12 | 分类号: | C12P13/12 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 封新琴 |
地址: | 法国圣*** | 国省代码: | 法国;FR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 表达 琥珀酸 脱氢酶 增加 甲硫氨酸 生产 | ||
1.一种用于在发酵工艺中生产甲硫氨酸的方法,其包括下述步骤:
-在包含碳源和硫源的合适培养基中培养经修饰用于甲硫氨酸的改善生产的微生物,和
-从所述培养基中回收甲硫氨酸,
其中所述微生物通过增强编码琥珀酸脱氢酶的基因的表达来进一步修饰。
2.权利要求1的方法,其中所述琥珀酸脱氢酶包含至少三个亚基,每个亚基由一种基因编码,所述基因各自的表达是增强的。
3.权利要求1或2的方法,其中所述编码琥珀酸脱氢酶的基因的增强表达是通过将所述基因的至少一个补充性拷贝插入所述微生物内实现的。
4.权利要求1–3的方法,其中所述sdh基因的增强表达是通过将大肠杆菌的四种基因sdhA、sdhB、sdhC和sdhD的至少一个补充性拷贝插入所述微生物内实现的。
5.权利要求1–4的方法,其中所述培养基中的所述硫源是硫酸盐、硫代硫酸盐、硫化氢、连二硫酸盐、连二亚硫酸盐、亚硫酸盐或所述不同来源的组合。
6.权利要求1–5的方法,其中所述碳源是葡萄糖或蔗糖。
7.权利要求1–6的方法,其包括从所述培养基中分离甲硫氨酸的步骤。
8.权利要求1–7的方法,其中所述微生物选自由细菌、酵母和真菌组成的组。
9.一种经修饰用于在合适培养基中甲硫氨酸的改善生产的微生物,其中所述微生物通过增强编码琥珀酸脱氢酶的基因的表达来进一步修饰。
10.权利要求9的微生物,其中所述琥珀酸脱氢酶包含至少三个亚基,每个亚基由一种基因编码,所述基因各自的表达是增强的。
11.权利要求9或10的微生物,其中所述编码琥珀酸脱氢酶的基因的增强表达是通过将所述基因的至少一个补充性拷贝插入所述微生物内实现的。
12.权利要求11的微生物,其中所述sdh基因的增强表达是通过将大肠杆菌的四种基因sdhA、sdhB、sdhC和sdhD的至少一个补充性拷贝插入所述微生物内实现的。
13.权利要求12的微生物,其包含来自大肠杆菌的sdh操纵子的另外拷贝。
14.权利要求8–13中任一项的微生物,其中所述微生物是选自下组的细菌:肠杆菌科(Enterobacteriaceae)和棒状杆菌形细菌(Coryneform bacteria)。
15.权利要求14的微生物,其中所述微生物选自由大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum)组成的组。
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